Реакция с кардиолипиновым антигеном

Микрореакция преципитации (МР) на сифилисRapid Plasma Reagin (RPR)

Что такое микрореакция преципитации Когда применяется микрореакция преципитации Как проводится микрореакция преципитации Как оценивается микрореакция преципитации Какие ошибки могут быть при постановке микрореакции Где можно получить еще информацию

Что такое микрореакция преципитации

Микрореакция преципитации является нетрепонемным тестом,основанным на иммунологической реакции антиген-антитело.Реакция определяет в крови так называемые реагиновые антитела,которые организм вырабатывает против липидов поврежденных бледной трепонемой клеток организма и ,возможно, липопротеинов мембраны спирохет.Антилипидные антитела могут вырабатываться при многих заболеваниях и состояниях организма,сопровождающихся разрушением тканей,поэтому микрореакция преципитации является не подтверждающим сифилис тестом,а отборочным.
Микрореакцией тест назван в связи с тем,что для исследования необходимо незначительное количество исследуемого материала и реагентов,а преципитацией (от лат. Precepitacio — падение) в связи с тем,что обрузующийся в результате реакции антиген-антител комплекс выпадает в осадок (преципитация) с образованием хлопьев (флоккуляция).
Разновидности микрореакций
1. Микроскопический тест — оценка результатов реакции с использованием световой микроскопии для подсчета преципитантов — VDRL ( (по названию лаборатории-разработчика – Venereal Diseases Research Laboratory) — реакция с инактивированной сывороткой крови. При подозрении на нейросифилис при помощи VDRL исследуют спинномозговую жидкость.
2. Макроскопический тест — оценка результатов реакции невооруженным глазом -тест быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagins, RPR),применяется в России под названиями реакция преципитации (РПР) с кардиолипиновым антигеном,отборочная реакция на сифилис (ОРС),микрореакция преципитации (МР),экспресс-диагностика сифилиса (ЭДС). Для подсчета применяют так называемые визуализирующие агенты,вовлекающиеся в комплекс антиген-антитело (чаще частицы угля и частицы толуидинового красного).
Количественная микрореакция преципитации
Проводится методом серийного разведения исследуемой сыворотки крови.Титром преципитинов считают последнее разведение плазмы или сыворотки крови,где обнаружен преципитат.

Когда применяется микрореакция преципитации

Скрининг на сифилис
Массовое обследование определенных групп населения.Для скрининга применяются дешевые,простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на микрореакции преципитации.Скринингу на сифилис подвергаются:

• Беременные женщины
• Доноры крови и органов для трансплантации
• Некоторые профессиональные контингенты (работники питания,образования,здравоохранения)
• Военнослужащие
• Лица,отбывающие наказание в местах лишения свободы
• Больные,готовящиеся к оперативному хирургическому вмешательству
• Лица,поступившие на стационарное лечение (обязательная вассерманизация — в России,странах СНГ и некоторых других странах)

Диагностика сифилиса
Для диагностики сифилиса применяются комбинация количественной модификации микрореакции преципитации и трепонемных тестов на сифилис.Серологическое обследование на сифилис назначается в следущих случаях:

• Лицам,имеющих клинические признаки сифилиса
• Лицам с любыми генитальными язвами
• Лицам — половым партнерам больных сифилисом,а также в случае близкого бытового контакта с больным вторичным сифилисом
• Детям,родившимся от больных сифилисом матерей
• Лицам с подтвержденным диагнозом других половых инфекций
• Для подтверждения результатов скрининга (отборочных реакций)

Контроль за лечением сифилиса
Так как к моменту снятия с учета леченного больного сифилисом микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном обычно негативируется, а позитивные специфические реакции (РИТ, РИФ, ИФА, РПГА.) могут наблюдаться долго после окончания лечения (поэтому эти тесты не могут служить критерием излеченности) микрореакция преципитации является основным тестом для установления критерия излеченности сифилиса.

Снижение титров нетрепонемных тестов в 4 и более раза в течении года после лечения подверждает эффективность проведенной терапии сифилиса и является критерием его излеченности( Приказ Минздрава РФ № 87 от 26.03.01 г,МЗ РФ Приказ от 25 июля 2003 г. N 327,Рекомендации CDC (USA) 2006)

Применяется количественная модификация микрореакции преципитации.Величина титра указывает на активность процесса, а его снижение во время лечения — на эффективность терапии. Стабильность титров должна настораживать в отношении эффективности терапии, увеличение их требует пересмотра лечения.

Как проводится микрореакция преципитации

Материал для исследования: кровь из пальца,венозная кровь,спинномозговая жидкость.Взятие крови желательно производить натощак.
Схема микрореакции преципитации
Для проведения реакции используется классический VDRL-антиген (кардиолипин+лецитин+холестерин) с добавлением частиц угля для визуальной оценки результатов.теста.Исследуемая сыворотка крови перемешивается на стекле с антигеном.Если в сыворотке содержатся реагиновые антитела то образуются чёрные хлопья (флоккулянты), являющиеся признаком положительной реакции. При отсутствии реагиновых антител в сыворотке образования хлопьев (флоккуляции) не происходит.
Результаты микрореакции на сифилис
При обнаружении антилипидных антител — положительная реакция (при проведении количественной модификации титры от 1: 2 до 1: 320 и выше
При отсутствии антилипидных антител — отрицательная реакция
При низких титрах антител — сомнительная реакция

Как оценивается микрореакция преципитации

Микрореакция становиться положительной в среднем через 4-5 недель после инфицирования.По мере развития сифилитической инфекции титры ее нарастают,при скрытом и позднем сифилисе количество антител уменьшается и микрореакция может быть оценена как слабоположительная или сомнительня,а иногда при третичном сифилисе и отрицательная.

Положительная реакция	Сифилис (первичный серопозитивный,вторичный, третичный,скрытый) Леченый сифилис (у 10% перенесших сифилис негативация не наступает в течении всей жизни) Серорезистентность после лечения сифилиса Ложноположительная реакция
Отрицательная реакция	Сифилиса нет Первичный серонегативный сифилис Ложноотрицательная реакция Нельзя исключить поздний сифилис

Наиболее часто в мировой венерологии,а последнее время и в России результаты микрореакции оценивает совместно с трепонемными тестами РИФ и РПГА

RPR,VDRL	РИФ (FTA)	РПГА (TPHA)	Интерпретация
			нет сифилиса или инкубационный период или очень ранняя стадия
+	+	+	нелеченный или недавно леченный сифилис
+	+		первичный сифилис или ложноположительные РПР и РИФ
+		+	ложноположительные РП и РПГА или ложноотрицательная РИФ
	+	+	леченный сифилис или нелеченный поздний сифилис
+			биологическая ложноположительная реакция
	+		ранний первичный сифилис или недавно леченный сифилис или ложноположительная РИФ
		+	пролеченный сифилис или ложноположительная РПГА

Какие ошибки могут быть при постановке микрореакции

Микрореакция преципитации не применяется для подтверждающей диагностики сифилиса,так как кроме антител к липидным антигенам бледной трепонемы, в этих реакциях определяются антитела к липидам и липопротеинам, образовавшимся в результате повреждения клеток организма.Поэтому положительные результаты нетрепонемных серологических реакций в ряде случаев могут быть не связаны с сифилисом,а быть результатом неспецифических повреждений тканей.Кроме того как к ложноположительным, так и ложноотрицательным результатам могут приводить нарушения при проведении теста.
Неправильная техника проведения исследования

• неправильное взятие крови из пальца (наличие пузырей воздуха в капилляре пипеток);
• исключение из постановки реакции контрольных сывороток крови, в частности, слабоположительных;
• неравномерная концентрация антигена в эмульсии вследствие недостаточного перемешивания ее перед использованием;
• бактериальное загрязнение эмульсии;
• нарушение сроков и условий хранения плазмы и сыворотки крови, антигена и его эмульсии, растворов;
• замена трехзамещенного цитрата натрия двухзамещенным;
• использование при постановке реакций загрязненных пробирок, пипеток, пластинок, растворов.

Причины ложноположительные результатов микрореакции на сифилис

1. Антифосфолипидный синдром
2. Невенерические трепонематозы
3. Беременность
4. Сахарный диабет
5. Туберкулез
6. Онкологические заболевания
7. Аутоиммунные (системные) заболевания (системная красная волчанка,дерматомиозит и.т.д.)
8. Подагра
9. Хронический алкоголизме и наркомании;
10. Инфекционный мононуклеоз (инфекция Эпштейн-Барра)
11. Вирусные гепатитаы
12. Пневмонии

Причины ложноотрицательных результатов микрореакции на сифилис
Встречаются редко и связаны с так называемым эффектом «прозоны» при очень высоком содержании антител в крови.Ложноотрицательные результаты надо отличать от отрицательных результатов микрореакции при первичном периоде сифилиса,когда при наличии сифилитической инфекции организм еще не успел выработать антитела и при позднем третичном сифилисе,когда уровень антилипидных антител существенно снижен.

При положительных результатах микрореакции преципитации) МР) ,если она не проводилась с целью контроля за излеченностью сифилиса,в обязательном порядке необходим осмотр дерматовенеролога и исследование крови с помощью трепонемных тестов

Где можно получить еще информацию

	Диагностика сифилиса Ложноположительные серореакции на сифилис
	Syphilis (eMedicine 2006)Full text Neurosyphilis (eMedicine 2007)Full text Подбор статей и резюме статей по теме из PubMed (National Library of Medicine)

посещений 174207 обновлено 11.06.10

Неспецифическая серологическая диагностика сифилиса Микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном (рмп)

Является отборочным тестом при массовом обследовании населения на сифилис.

Постановка: плазма или инактивированная сыворотка крови + специ­альный кардиолипиновый антиген (экстракт бычьего сердца, обогащенный холестерином и лецитином). Образуется преципитат (комплекс антиген — ан­титело), выпадающий в осадок в виде хлопьев белого цвета.

РМП можно проводить и по количественной методике с разведением сыворотки крови.

Преимущества экспресс-метода:

• быстрота ответа (30-40 минут),

• небольшой объем необходимой для анализа крови (2-3 капли плазмы или сыворотки).

Источники ошибок при постановке РМП:

• неправильное взятие крови из пальца (наличие пузырей воздуха в капил­ляре пипеток);

• неравномерная концентрация антигена в эмульсии вследствие недоста­точного перемешивания ее перед использованием;

• бактериальное загрязнение эмульсии;

• нарушение сроков и условий хранения плазмы и сыворотки крови, ан­тигена и его эмульсии, растворов;

• использование при постановке реакций загрязненных пробирок, пипе­ток, пластинок, растворов.

Вышеуказанные ошибки могут приводить к появлению как ложноот­рицательных, так и ложноположительных результатов реакции.

После окончания терапии ставится РМП и по снижению титра судят о ди­намике инфекционного процесса и эффективности терапии.

Подтверждением эффективности проведенной терапии считается сниже­ние титра в 4 и более раз в течение 1 года; по окончании этого срока осуще­ствляется постановка той же специфической реакции, что и при первичном обследовании.

Диагностические подтверждающие серологические реакции

ИФА, РИФ и РПГА являются высокочувствительными и высокоспеци­фичными реакциями на сифилис.

Ввиду различной чувствительности при разных формах сифилиса, спе­цифичности и сложности постановки каждая из указанных реакций имеет свое предназначение.

Профилактическое обследование населения на сифилис можно прово­дить с помощью РМП, ИФА и РПГА.

При получении положительного результата РМП пациент должен об­следоваться дерматовенерологом с повторным исследованием крови в любом диагностическом тесте на сифилис.

При профилактическом обследовании на сифилис больных глазных, пси­хоневрологических, кардиологических стационаров, беременных должны ис­пользоваться ИФА или РПГА.

При обследовании доноров необходимо применять ИФА или РПГА, но обязательно в сочетании с РМП. Постановка двух реакций одновременно обусловлена высокой ответственностью данного исследования.

Вышеуказанные специфические тесты служат для диагностики всех форм сифилиса, в частности, скрытого, а также для распознавания ложно­положительных результатов, полученных в РМП.

Следует учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оста­ваться положительными (не негативировать) в течение ряда лет, а в отдель­ных случаях остаются положительными на всю жизнь.

Иммуноферментный анализ для серо- и ликвородиагностики сифилиса

‘■ } ; // U! £//—

Принцип:- шшша Т. pallidum сенсибилизируются к поверхности твер­дофазового носителя (лунки панелей). Добавляется исследуемая сыворотка. При наличии антител против Т. pallidum образуется комплекс антиген- антитело, связанный с поверхностью носителя. На следующем этапе в лунки наливают антивидовую сыворотку (против иммуноглобулинов человека), ме­ченую ферментом (пероксидазой или щелочной фосфатазой). Меченые анти­тела взаимодействуют с комплексом антиген-антитело, образуя новый ком­плекс. Для его выявления в лунки наливают раствор субстрата (5- аминосалициовая кислота). Под действием фермента субстрат меняет цвет, что указывает на положительный результат.

Оптимальным в случае использования ИФА считается одновременное применение трех его вариантов:

• выявление суммарных AT (CAT)

• последующее дифференцированное определение трепонемоспецифических IgM и IgG.

Появление противосифилитических антител происходит в соответствии с общими закономерностями иммунного ответа. Вначале появляются IgM на 2- 4 неделе после заражения и исчезают у нелеченных больных примерно через 18 месяцев; при лечении раннего сифилиса через 3-6 месяцев; позднего — че­рез год. По мере развития болезни начинает преобладать синтез IgG, которые появляются на 4 неделе после заражения, достигают более высоких титров и длительно сохраняются даже после клинического излечения.

Источники возникновения ошибок при использовании ИФА-тест- систем:

• нарушения техники взятия крови, условий транспортировки и хранения тест-систем и проб.

• некачественная работа лаборантов,

• любые отклонения от инструкции по применению тест-системы,

• неисправность инструментов и приборов,

Кровь на сифилис микрометодом это что

Микрореакция преципитации является нетрепонемным тестом,основанным на иммунологической реакции антиген-антитело.Реакция определяет в крови так называемые реагиновые антитела,которые организм вырабатывает против липидов поврежденных бледной трепонемой клеток организма и ,возможно, липопротеинов мембраны спирохет.Антилипидные антитела могут вырабатываться при многих заболеваниях и состояниях организма,сопровождающихся разрушением тканей,поэтому микрореакция преципитации является не подтверждающим сифилис тестом,а отборочным.
Микрореакцией тест назван в связи с тем,что для исследования необходимо незначительное количество исследуемого материала и реагентов,а преципитацией (от лат. Precepitacio — падение) в связи с тем,что обрузующийся в результате реакции антиген-антител комплекс выпадает в осадок (преципитация) с образованием хлопьев (флоккуляция).

1. Микроскопический тест — оценка результатов реакции с использованием световой микроскопии для подсчета преципитантов — VDRL ( (по названию лаборатории-разработчика – Venereal Diseases Research Laboratory) — реакция с инактивированной сывороткой крови. При подозрении на нейросифилис при помощи VDRL исследуют спинномозговую жидкость.

2. Макроскопический тест — оценка результатов реакции невооруженным глазом -тест быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagins, RPR),применяется в России под названиями реакция преципитации (РПР) с кардиолипиновым антигеном,отборочная реакция на сифилис (ОРС),микрореакция преципитации (МР),экспресс-диагностика сифилиса (ЭДС). Для подсчета применяют так называемые визуализирующие агенты,вовлекающиеся в комплекс антиген-антитело (чаще частицы угля и частицы толуидинового красного).

Количественная микрореакция преципитации
Проводится методом серийного разведения исследуемой сыворотки крови.Титром преципитинов считают последнее разведение плазмы или сыворотки крови,где обнаружен преципитат.

Скрининг на сифилис
Массовое обследование определенных групп населения.Для скрининга применяются дешевые,простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на микрореакции преципитации.Скринингу на сифилис подвергаются:

• Беременные женщины
• Доноры крови и органов для трансплантации
• Некоторые профессиональные контингенты (работники питания,образования,здравоохранения)
• Военнослужащие
• Лица,отбывающие наказание в местах лишения свободы
• Больные,готовящиеся к оперативному хирургическому вмешательству
• Лица,поступившие на стационарное лечение (обязательная вассерманизация — в России,странах СНГ и некоторых других странах)

Диагностика сифилиса
Для диагностики сифилиса применяются комбинация количественной модификации микрореакции преципитации и трепонемных тестов на сифилис.Серологическое обследование на сифилис назначается в следущих случаях:

• Лицам,имеющих клинические признаки сифилиса
• Лицам с любыми генитальными язвами
• Лицам — половым партнерам больных сифилисом,а также в случае близкого бытового контакта с больным вторичным сифилисом
• Детям,родившимся от больных сифилисом матерей
• Лицам с подтвержденным диагнозом других половых инфекций
• Для подтверждения результатов скрининга (отборочных реакций)

Контроль за лечением сифилиса
Так как к моменту снятия с учета леченного больного сифилисом микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном обычно негативируется, а позитивные специфические реакции (РИТ, РИФ, ИФА, РПГА.) могут наблюдаться долго после окончания лечения (поэтому эти тесты не могут служить критерием излеченности) микрореакция преципитации является основным тестом для установления критерия излеченности сифилиса.

Снижение титров нетрепонемных тестов в 4 и более раза в течении года после лечения подверждает эффективность проведенной терапии сифилиса и является критерием его излеченности( Приказ Минздрава РФ № 87 от 26.03.01 г,МЗ РФ Приказ от 25 июля 2003 г. N 327,Рекомендации CDC (USA) 2006)

Применяется количественная модификация микрореакции преципитации.Величина титра указывает на активность процесса, а его снижение во время лечения — на эффективность терапии. Стабильность титров должна настораживать в отношении эффективности терапии, увеличение их требует пересмотра лечения.

Материал для исследования: кровь из пальца,венозная кровь,спинномозговая жидкость.Взятие крови желательно производить натощак.

Схема микрореакции преципитации
Для проведения реакции используется классический VDRL-антиген (кардиолипин+лецитин+холестерин) с добавлением частиц угля для визуальной оценки результатов.теста.Исследуемая сыворотка крови перемешивается на стекле с антигеном.Если в сыворотке содержатся реагиновые антитела то образуются чёрные хлопья (флоккулянты), являющиеся признаком положительной реакции. При отсутствии реагиновых антител в сыворотке образования хлопьев (флоккуляции) не происходит.

Результаты микрореакции на сифилис
При обнаружении антилипидных антител — положительная реакция (при проведении количественной модификации титры от 1: 2 до 1: 320 и выше
При отсутствии антилипидных антител — отрицательная реакция
При низких титрах антител — сомнительная реакция

Микрореакция становиться положительной в среднем через 4-5 недель после инфицирования.По мере развития сифилитической инфекции титры ее нарастают,при скрытом и позднем сифилисе количество антител уменьшается и микрореакция может быть оценена как слабоположительная или сомнительня,а иногда при третичном сифилисе и отрицательная.

По материалам venuro.ru

Микрореакция на сифилис – лабораторное исследование, выполняемое с целью подтверждения или исключения присутствия в крови антител к бледной трепонеме. Такой анализ называют реакцией микропреципитации (МР), реакцией быстрых плазменных реагинов (RPR).

Существует разновидность такой реакции – ее называют микроскопическим исследованием VRDL, выполняемым с помощью световой микроскопии.

Реакцией микропреципитации это исследование называют потому, как при положительном ее результате происходит выпадение в осадок (преципитация) хлопьев (это и есть комплекс «антиген-антитело»).

Микрореакция на сифилис проводится путем анализа сыворотки крови.

Исследование основано на связывании специфического комплекса «антиген-антитело».

В роли антигена в данном случае выступает кардиолипиновый антиген, антител – липопротеины разрушающихся под действием бледных трепонем тканей организма и, возможно, компоненты клеточной оболочки возбудителя.

Следует иметь в виду, что микрореакция на сифилис не может использоваться с целью подтверждения болезни. Это исследование является лишь отборочным, так как разрушением тканей сопровождается не только сифилис.

Также и целый ряд других заболеваний (системные коллагенозы, туберкулез и т.д.).

Поэтому положительная микрореакция на сифилис может наблюдаться, в том числе, и в этих случаях. Такой результат исследования не может являться подтверждением наличия сифилитической инфекции. Он лишь служит сигналом для проведения дополнительных уточняющих анализов.

МР – серологическое исследование, используемое с целью массового скрининга населения на сифилис. Его проводят при постановке на учет по беременности, в ходе медосмотров работников здравоохранения, образования, общественного питания.

Также перед стационарным лечением и операцией, у доноров крови и трансплантируемых органов.

Кроме того, МР незаменима для быстрой диагностики сифилиса у людей, близко контактирующих с сифилитическими больными.

Также у тех, чей половой партнер заражен сифилисом.

Реакцию микропреципитации проводят у всех пациентов с язвенными, эрозивными, папулезными высыпаниями на половых органах.

Необходим такой анализ и с целью контроля зараженности после незащищенных половых контактов со случайными партнерами. Это неспецифический, нетрепонемный тест, поэтому подходит он лишь для первоначальной, экспресс-диагностики инфекции.

При положительном результате проводятся специфические трепонемные серореакции (ИФА, РПГА).

Позволяющие точно верифицировать диагноз и подтвердить заболевание.

Микрореакция на сифилис позволяет диагностировать не только качественно (на присутствие антител к трепонеме), но и количественно – определять титр антител и интенсивность течения заболевания.

Отрицательная микрореакция на сифилис означает, что в крови пациента отсутствуют антитела к бледной трепонеме и заболевания нет.

МР – исследование, которое используют с целью оценки эффективности лечения сифилиса.

По окончании курса специфической медикаментозной терапии проводится микрореакция.

При ее отрицательном результате делается вывод об успешности и эффективности терапии.

При положительном – терапия продолжается, возможно, меняется ее тактика и выбор препаратов.

Использовать специфические трепонемные тесты для контроля излеченности сифилисом нецелесообразно.

Так как они могут оставаться положительными на протяжении всей жизни пациентов, даже при их давнем выздоровлении.

Сдавать кровь на МР следует утром натощак, кровь берут из вены.

За день до этого следует воздержаться от употребления алкоголя, жирной, жареной и тяжелой пищи.

Если вы хотите провести анализ микрореакция на сифилис — обращайтесь в нашу клинику.

По материалам venerologiya.moscow

Отборочный метод исследования крови для диагностики сифилиса называют микрореакцией преципитации. Он проводится для выявления в крови антител, которые представляют собой специфические белки, синтезируемые иммунной системой. Эти вещества выделяются при образовании в организме антигенов – липидных веществ из клеточных мембран, разрушенных бледной трепонемой (возбудитель сифилиса). Методика отличается простотой в использовании, быстротой проведения и низкими финансовыми затратами.

Микрореакция относится к неспецифическим (нетрепонемным) методам исследования, потому что выявляет не возбудитель, а повреждение клеток. Их разрушение может возникать при других патологиях в организме. При положительном результате анализа назначают специфические серологические тесты, такие как ИФА (иммуноферментный анализ), РПГА (реакция прямой гемагглютинации), РИФ (реакция иммунофлюоресценции). Они позволяют напрямую выявлять содержание возбудителя сифилиса.

Выделяют микрореакцию преципитации нескольких типов.

1. Тест с макроскопией (экспресс-диагностика сифилиса). Выявление комплекса из антигенов и антител проводится без использования аппаратуры. Для визуализации невооруженным глазом в сыворотку крови добавляют химическое вещество, которое соединяется с комплексом. Применяют частички угля или красный пигмент.
2. Тест с микроскопией . Для выявления липидных антител используют световой микроскоп, который позволяет не применять дополнительных веществ.
3. Тест с количественным показателем . Проводится в условиях многократного разведения исследуемого материала и выявления количества комплексов в каждой порции. Титром считается последнее разведение, в котором определяется связка антиген-антитело.

Исследование проводят для выявления возбудителей сифилиса среди больших групп населения. Главной целью анализа является массовость проведения скринингового теста для последующей диагностики в случае положительных результатов.

Кровь на микрореакцию назначают:

• при госпитализации в стационар;
• заключенным в местах лишения свободы;
• перед проведением оперативного вмешательства;
• беременным женщинам;
• лицам, проходящим военную службу;
• во время проведения медицинских осмотров работникам образования, медицины, общепита;
• донорам крови или органов.

Метод широко используется для проведения контроля эффективности лечения. Микрореакция преципитации относится к достоверным методам выздоровления от сифилиса. Кроме того, количественный тест помогает корректировать дозировку препаратов или проводить их замену. Стоит отметить, что специфические серологические анализы не несут в себе такую информацию и дают положительные результаты после уничтожения возбудителя в организме.

Для исследования делают забор капиллярной крови из пальца, венозной крови из локтевой вены натощак или получают спинномозговую жидкость. Анализ проводят на стерильном обезжиренном стекле, куда помещают классический реагент (антиген), каплю сыворотки или плазмы. После тщательного перемешивания ингредиентов и добавления частиц угля при макроскопии следят за результатами реакции.

1. Положительная реакция . Характеризуется образованием хлопьев в осадке при обнаружении антител к липидам разрушенных клеточных мембран. Она свидетельствует о заболевании любой формой сифилиса, а также о сохранении титра у небольшой группы людей после лечения болезни.
2. Отрицательная реакция . Характеризуется отсутствием образования характерных хлопьев, кровь не содержит специфических белков. Это означает, что сифилис не выявлен, либо находится на поздней стадии. В некоторых случаях обследование проводят на ранних этапах первичной формы болезни, когда антитела еще не образовались или их количество ничтожно мало.
3. Сомнительная реакция . Выявляется незначительное выпадение осадка, что свидетельствует о низком содержании антилипидных антител. В таких случаях необходимо наблюдение, повторные анализы, назначение дополнительных методов обследования.

Возможность обнаружения иммунных комплексов при помощи микрореакции преципитации наступает через месяц после заражения. В процессе развития болезни концентрация антител нарастает. При скрытой форме и позднем сифилисе титр может быть невысоким, а иногда давать отрицательные реакции.

В некоторых случаях кровь при обследовании дает ложные результаты. На это может влиять нарушение техники проведения теста. Некачественный забор исследуемого материала и его неправильное хранение, недостаточное перемешивание или загрязнение часто вызывают ошибочные реакции.

Ложноположительные результаты возникают при различных патологических и физиологических состояниях в организме. Поэтому весомое значение для верной трактовки микрореакции имеет выявление этих факторов. Ложноположительные результаты вызывают:

• вынашивание плода;
• новообразования;
• вирусные повреждения печени;
• сахарный диабет;
• воспаление легких, туберкулез;
• аутоиммунная патология;
• подагра;
• злоупотребление алкогольными напитками;
• наркотическая зависимость.

Ложноотрицательные результаты микрореакции образуются при высоком содержании иммунных комплексов в крови либо в первые недели заболевания при ничтожно малом количестве антител. В сомнительных случаях назначается консультация венеролога для осмотра кожных покровов и слизистых оболочек, проведение специфических серологических анализов.

Микрореакция преципитации крови считается эффективным скрининг-тестом для выявления сифилиса и контроля эффективности терапии. Она позволяет выявлять тяжелую патологию среди широких масс населения, назначать своевременное лечение, избегать развития запущенных форм заболевания.

По материалам serdec.ru

Для установления заболеваний используются разные способы, в том числе и лабораторные методы. Микрореакция крови — это вид анализа в ходе диагностики сифилиса для выявления повреждения клеток.

Исследование не является специфическим анализом, поскольку не ставит задачей найти возбудителя. Разрушение клеток может происходить и при других заболеваниях. Поэтому если результаты теста распознаются как положительные, необходимо проведение других лабораторных тестов.

Заболевания, передающиеся половым путём, вызываются различными возбудителями. Когда они попадают в организм, иммунитет реагирует на это повышением синтеза веществ, которые должны бороться с ними. В ответ на размножение возбудителя вырабатываются антитела, связывающие его. Сколько бактерий, столько должно быть и антител.

В ходе борьбы бледная трепонема или другой возбудитель разрушает мембрану собственных клеток. Эти остатки также требуется удалить, на что и реагирует антитело.

Анализ показывает наличие таких компонентов, их комплексов, антител и антигенов. Каждый из них можно количественно определить.

Все неспецифические исследования можно разделить на две большие категории: макро- и микрореакции. Первая осуществляется без дополнительного оборудования, оценивается визуально. Вторая требует оборудования в виде микроскопа высокой степени увеличения.

Электронная микроскопия позволяет выявить разрушенные клетки без использования реактива.

Различают несколько типов анализа крови на микрореакцию:

• экспресс-тест с макроскопией;
• классическое исследование с изучением осадка;
• количественное определение.

Первый метод не требует исследования материала под микроскопом, результат виден невооруженным глазом.

Суть проведения анализа в том, что кровь больного помещается в центрифугу, получается сыворотка, в которую необходимо добавить концентрат раствора. При наличии возбудителя происходит окрашивание жидкости.

При втором способе сыворотку крови исследуют под микроскопом, дополнительные вещества не используются. Для получения количественного значения сыворотка многократно разводится, потом направляется под микроскоп, и лаборант регистрирует количество связанных комплексов антиген-антитело в мазке.

Ввиду простоты исследования и отсутствия необходимости использования дорогостоящих реагентов, микрореакция преципитации используется для больших групп населения, чаще всего при плановом обследовании.

Сдача анализа назначается:

• военнослужащим;
• беременным;
• больным перед операцией;
• при обследовании в тюрьме или следственном изоляторе;
• при осмотре медицинских работников, сотрудников общественного питания;
• перед сдачей крови на донорство;
• перед трансплантацией органов.

При лечении для контроля эффективности назначенной терапии исследование проводится несколько раз.

Тест на количественную реакцию показан лицам, у которых обнаружились признаки патологии, детям больных родителей, при язвах на половых органах. Также обследование нужно для подтверждения диагноза после первичных тестов или если пациент имеет другие венерические заболевания.

Чтобы получить достоверный результат, необходимо соблюдать правила сдачи крови. Есть несколько важных моментов, которые необходимо учитывать.

Чтобы не спровоцировать выброс излишка гормонов, обследуемый должен отказаться от значительной физической нагрузки перед забором крови, от курения, от алкоголя накануне, жирной пищи.

Сдача крови происходит натощак, поскольку липиды будут появляться пленкой сверху пробирки и могут исказить результат. Последний прием пищи должен происходит накануне около 19 часов вечера.

Для микрореакции необходимо взять капиллярную кровь, то есть из пальца. Она подвергается центрифугированию, то есть удаляется сгусток из форменных элементов, остается плазма. Дополнительно берут кровь из вены. Если ее невозможно взять, то подойдет спинномозговая жидкость.

Биологический материал отстаивается, плазма или сыворотка смешивается с антигеном. Одновременно с этим идет оценка протекания реакции. Медицинский работник должен следить, появляется ли изменение окраски жидкости.

Венозная кровь показывает наличие следов возбудителя уже через 3-4 недели после заражения. Срок годности исследования зависит от его назначения и нормативов лечебного учреждения.

• В ходе лечения результат реакции оценивается каждые несколько недель.
• Действие анализа для медицинских работников при отрицательном результате составляет 12 месяцев.
• После контакта с потенциально больным человеком необходимо провести тест через месяц анализ независимо от того, как давно проводилось предыдущее исследование.

Рассказывая, что это такое — микрореакция крови, необходимо также упомянуть о том, как происходит расшифровка результатов. Она может предполагать отрицательный, положительный или сомнительный итог.

Иногда определяется ложноположительный результат или ложноотрицательный. О причинах такого явления будет рассказано ниже.

Такая реакция наблюдается, если на предметном стекле обнаруживаются хлопья. Значит, в сыворотке имеются антитела, которые вырабатывались к фрагментам антигена или разрушенным ими клеткам.

Результат “+” длительное время может наблюдаться даже после проведенного лечения, поскольку на очищение крови от всех фрагментов трепонем и остатков разрушенных клеток требуется немалый период. Но титр антигена будет иметь небольшое значение.

Положительная реакция может свидетельствовать о наличии у больного сифилиса, получении серорезистентности, остаточных явлениях после терапии. Бывает и ложноположительный результат.

Отрицательная реакция наблюдается, если на предметном стекле не произошло никаких изменений, нет хлопьев. Это показывает, что нет заболевания или оно уже достигло поздней стадии.

В некоторых случаях реакция проводится слишком рано, когда еще нет антител или их фракция настолько мала, что оценить результат как положительный нет возможности. Это ложноотрицательная реакция.

Пациент успокаивается, считая, что не болен, и узнает об инфекции, когда разворачивается клиническая картина.

Исследование материала может выявить наличие незначительного осадка, то есть антител мало. Такой результат получается, если не соблюдать правила хранения или забора материала, использовать нестерильные материалы или нарушить правила подготовки. Достоверные результаты получаются, только если соблюдать все рекомендации перед тестированием.

Сомнительный анализ бывает и при наличии некоторых заболеваний или состояний, о которых пациент мог не знать или умолчать:

• беременность;
• опухоль;
• диабет;
• аутоиммунные процессы;
• острый воспалительный процесс легких;
• туберкулез;
• алкоголизм;
• подагра;
• наркозависимость.

Этот метод исследования при положительном результате не говорит о том, что сифилис подтвержден. Это только общий, первичный анализ, который требует уточнения. Реакция может показать наличие антител к другим возбудителям.

Для подтверждения диагноза требуется проведение трепонемных тестов — ИФА или РИА, основанных на комплексе антиген-антитело. Они позволяют определить трепонему, результат ее активности и следы жизнедеятельности.

Таким образом, анализ на микрореакцию позволяет определить наличие антител к трепонеме, но не является специфическим. Он применяется для обследования широких групп населения и позволяет выявить здоровых людей и тех, кому нужны дополнительные, более сложные анализы.

По материалам prososud.ru

>Микрореакция с кардиолипиновым антигеном

Ключевые слова: сифилис бледная трепонема зппп заболевания передающиеся половым путем венерические заболевания твердый шанкр сифилома кровь

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном (RPR — Rapid Plasma Reagin) — скрининговый метод диагностики сифилиса, (является нетрепонемным тестом, так называемые реагиновые или кардиолипиновые тесты, которые проводят при первичном обследовании на сифилис) посредством определения реагинов — антител класса IgM и IgG (их еще называют реагины), образующихся против антигенов липидного происхождения, образовавшихся при повреждении клеток больного сифилисом или против липидных антигенов бледной трепонемы. Основные показания к применению: первичное обследование на сифилис, медицинские осмотры, контроль эффективности лечения.

RPR — первичный скрининговый тест на сифилис, выявляющий антифосфолипидные антитела (своего рода отборочный тест для последующего подробного обследования на сифилис). В настоящее время одна из классических реакций диагностики сифилиса — реакция Вассермана в лабораториях практически не выполняется. На смену этой реакции пришли новые современные методы ИФА-диагностики.

Метод RPR, в какой то мере, можно рассматривать как замену реакции Вассермана. Метод RPR относится к нетрепонемным тестам. Антитела выявляемые в RPR реакции появляются, как правило, появляются в крови больного через 3-5 недель после заражения (через 10 дней после появления первичного шанкра). В первые 10 дней после появления твердого шанкра они, как правило, не обнаруживаются.

Считается, что RPR-тест положителен в 78% случаев при первичном сифилисе и в 97% случаев при вторичном сифилисе. Низкий титр реагиновых антител (менее 1:8) в первую очередь свидетельствует о ложноположительной реакции, однако такие цифры можут быть и при позднем сифилисе.

Следует учитывать, что липопротеиды трепонем и тканей человека сходны друг с другом, поэтому результаты нетрепонемных реакций могут быть в ряде случаев ложноположительными. Образовавшиеся антитела могут быть неспецифическими — их называют реагины. Они образуются на липидные антигены бледной трепонемы и против аутоантигенов, которые образуются при разрушении клеток больных.

Поскольку тест не специфический, то можно ожидать получение как ложноположительных, так и ложноотрицательных результатов. В случае положительной реакции RPR проводят тесты — ИФА, РПГА, РИФ, РИТ. Присутствие в крови антител к фосфолипидам является одной из причин получения ложноположительных результатов в реакции преципитации с кардиолипиновым антигеном (VDRL-тест – Venereal Disease Research Laboratory).

В VDRL-тесте определяют агглютинацию липидных частиц, содержащих холестерин и кардиолипин. Антитела к фосфолипидам присоединяются к кардиолипину этих частиц и вызывают их агглютинацию. Аналогичная реакция наблюдается у больных сифилисом, у которых ложноположительный характер VDRL-теста должен быть доказан отрицательными результатами специфических методов исследования на сифилис, которые выявляют непосредственно антитела к трепонемным антигенам.

Ложноположительная реакция может наблюдаться при аутоиммунных заболеваниях (системная красная волчанка, склеродермия). Ложноположительная реакция также является одним из признаков АФС (в результате повышения содержания антител к кардиолипину). Выявляются, также, больные с транзиторно-положительной реакцией, которые часто болеют вирусными и бактериальными инфекциями (мононуклеоз, лепра, малярия, боррелиоз — болезнь Лайма, корь, ветряная оспа, хламидиоз, туберкулез), при беременности.

Данные антитела у больных сифилисом образуются, как правило, в 70-80% случаев при первичном сифилисе, и практически, достигают 97% у больных со вторичным и ранним латентным сифилисом. После успешного лечения сифилиса у 90% пациентов реакция RPR становится отрицательной.

Согласно приказу МЗ РФ от 26.03.2001 г. за №87 «О совершенстовании серологической диагностики сифилиса» последовательность обследования пациентов на сифилис представляется следующим образом:

• При первичном обследовании производится постановка отборочной (скрининговой) реакции микропреципитации (РМП) или её модификации (RPR — РПР, TRUST — ТРАСТ, VDRL — ВДРЛ) в количественном и качественном вариантах и в случае положительного результата — любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, КСР, РИФ, РИТ).
• После окончания терапии ставится РМП или её модификация и по снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года.
• По окончанию этого срока осуществляется постановка той же специфической реакции, что и при первичном обследовании. Следует учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оставаться положительными (не негативировать) в течение ряда лет, а в отдельных случаях остаются положительными на всю жизнь.

Является отборочным тестом при массовом обследовании населения на сифилис.

Постановка: плазма или инактивированная сыворотка крови специ­альный кардиолипиновый антиген (экстракт бычьего сердца, обогащенный холестерином и лецитином). Образуется преципитат (комплекс антиген — ан­титело), выпадающий в осадок в виде хлопьев белого цвета.

РМП можно проводить и по количественной методике с разведением сыворотки крови.

быстрота ответа (30-40 минут),

небольшой объем необходимой для анализа крови (2-3 капли плазмы или сыворотки).

неправильное взятие крови из пальца (наличие пузырей воздуха в капил­ляре пипеток);

неравномерная концентрация антигена в эмульсии вследствие недоста­точного перемешивания ее перед использованием;

бактериальное загрязнение эмульсии;

нарушение сроков и условий хранения плазмы и сыворотки крови, ан­тигена и его эмульсии, растворов;

использование при постановке реакций загрязненных пробирок, пипе­ток, пластинок, растворов.

Вышеуказанные ошибки могут приводить к появлению как ложноот­рицательных, так и ложноположительных результатов реакции.

После окончания терапии ставится РМП и по снижению титра судят о ди­намике инфекционного процесса и эффективности терапии.

Подтверждением эффективности проведенной терапии считается сниже­ние титра в 4 и более раз в течение 1 года; по окончании этого срока осуще­ствляется постановка той же специфической реакции, что и при первичном обследовании.

ИФА, РИФ и РПГА являются высокочувствительными и высокоспеци­фичными реакциями на сифилис.

Ввиду различной чувствительности при разных формах сифилиса, спе­цифичности и сложности постановки каждая из указанных реакций имеет свое предназначение.

Профилактическое обследование населения на сифилис можно прово­дить с помощью РМП, ИФА и РПГА.

При получении положительного результата РМП пациент должен об­следоваться дерматовенерологом с повторным исследованием крови в любом диагностическом тесте на сифилис.

При профилактическом обследовании на сифилис больных глазных, пси­хоневрологических, кардиологических стационаров, беременных должны ис­пользоваться ИФА или РПГА.

При обследовании доноров необходимо применять ИФА или РПГА, но обязательно в сочетании с РМП. Постановка двух реакций одновременно обусловлена высокой ответственностью данного исследования.

Вышеуказанные специфические тесты служат для диагностики всех форм сифилиса, в частности, скрытого, а также для распознавания ложно­положительных результатов, полученных в РМП.

Следует учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оста­ваться положительными (не негативировать) в течение ряда лет, а в отдель­ных случаях остаются положительными на всю жизнь.

Принцип:- шшша Т. pallidum сенсибилизируются к поверхности твер­дофазового носителя (лунки панелей). Добавляется исследуемая сыворотка. При наличии антител против Т. pallidum образуется комплекс антиген- антитело, связанный с поверхностью носителя. На следующем этапе в лунки наливают антивидовую сыворотку (против иммуноглобулинов человека), ме­ченую ферментом (пероксидазой или щелочной фосфатазой).

выявление суммарных AT (CAT)

последующее дифференцированное определение трепонемоспецифических IgM и IgG.

Появление противосифилитических антител происходит в соответствии с общими закономерностями иммунного ответа. Вначале появляются IgM на 2- 4 неделе после заражения и исчезают у нелеченных больных примерно через 18 месяцев; при лечении раннего сифилиса через 3-6 месяцев; позднего — че­рез год. По мере развития болезни начинает преобладать синтез IgG, которые появляются на 4 неделе после заражения, достигают более высоких титров и длительно сохраняются даже после клинического излечения.

нарушения техники взятия крови, условий транспортировки и хранения тест-систем и проб.

некачественная работа лаборантов,

любые отклонения от инструкции по применению тест-системы,

неисправность инструментов и приборов,

В настоящий момент существует множество специфических методов диагностики, которые используются при различных заболеваниях.

Одним из них является реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, которая применяется при диагностике сифилиса.

Такая процедура отличается наибольшей достоверностью и имеет множество других преимуществ перед другими способами диагностики данного заболевания.

Правильная подготовка к проведению МРП существенно увеличивает достоверность результатов процедуры. Выполнять подготовительные меры следует при любых видах анализа крови.

Сифилис — распространенное венерическое заболевание

Перед выполнением реакции микропреципитации необходимо на некоторый промежуток времени отказаться от употребления пищи и любых напитков кроме минеральной воды. Временной промежуток между последним приемом пищи и забором материала на анализ должен составлять не менее 8 часов.

В случае если процедура назначена в период приема лекарственных средств с целью определения эффективности лечения, необходимо проконсультироваться со специалистом.

Применение пенициллина и других антибиотиков, которые часто назначаются при сифилисе, могут повлиять на достоверность процедуры.

Забор материала для процедуры микропреципитации должна осуществляться за 1-2 недели до начала медикаментозной терапии или же после их отмены. Если прекращение приема является невозможным, необходимо предупредить специалиста, при этом точно указав дозировку лекарства и схему приема.

За 1-2 дня до сдачи крови пациенту категорически противопоказаны существенные физические нагрузку. Помимо этого, недопустимым является употребление алкогольных напитков, жирной или жареной пищи. Рекомендуется ограничить потребление кофеина и других веществ, которые могут влиять на качественные характеристики крови.

Забор материала для теста осуществляется, как правило, в утреннее время суток. Для процедуры микопреципитации используется сыворотка, которая получается в результате очистки крови от некоторых структурных компонентов.

В большинстве случаев, получить результаты исследования можно через 1-2 дня с момента забора крови на анализ. В случае положительной реакции, пациенту назначается необходимое количество инъекций, а также вспомогательные лекарственные средства и процедуры.

Перед проведением РМП очень важно соблюдать ряд ограничений и подготовительных мер, так как это способствует получению более достоверного результата.

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном – один из ранних диагностических методов, применяемых для выявления инфекции, вызывающей развитие сифилиса. Процедура отличается высокой достоверностью, однако ее применение целесообразно только при первичном сифилисе, так как при вторичной и третичной форме болезни вероятность положительного результате значительно снижается.

Понравилось? Лайкни и сохрани у себя на страничке!

Отклонения от нормы

• Первичный сифилис в 78% случаев после заражения через 5-6 недель.
• Вторичный сифилис в 97% случаев после заражения через 2-6 месяцев.
• Третичный серопозитивный сифилис после заражения через 3 года.
• Вторичный, поздний или латентный сифилис (низкие титры у 50% лиц могут выявляться в течение 2-х лет).

• Ревматические заболевания — СКВ, склеродермия, ревматоидныйц артрит.
• Признак АФС, как результат увеличения антител к кардиолипину.
• Онкологические заболевания.
• Инфекционный мононуклеоз, малярия, лептоспироз, хламидиоз, микоплазменная инфекция.
• Сахарный диабет.
• Подагра.
• Гемобластозы.
• Активный туберкулез, корь, ветряная оспа, скарлатина
• Вирусные гепатиты.
• При беременности (в редких случаях).
• Около 10% лиц старше 70 лет.
• Ложноотрицательный результат при кардиолипиновом тесте возможен при вторичном сифилисе из-за феномена «прозоны» — отсутствие реакции Антиген-Антитело вследствие избытка какого либо из реагентов при использовании неразведенной сыворотки больного. Такой эффект возможен у детей грудного возраста при врожденном сифилисе из-за большого наличия антител.
• Временно ложноотрицательный кардиолипиновый результат возможен у пациентов с ВИЧ-инфекцией при вторичном сифилисе

• Инфицирования не было.
• В ряде случаев при раннем первичном (серонегативном) сифилисе и позднем третичном сифилисе. При врожденном сифилисе у детей грудного возраста ( явление прозоны, когда количество антител превышает количество антигенов).

Главная | О нас | Обратная связь

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном (МР) на сифилис в норме от­рицательная.

МР позволяет выявить антитела к кардиолипиновому антигену бледной спирохеты. МР при изолированном применении является не диагностическим, а отборочным тестом, в связи с чем на основании ее позитивности диагноз сифилиса не устанавливают, а пациенту проводят диагностические тесты (РСК, ИФА). С помощью МР обследуют лиц, подлежащих периодическим медицинским осмотрам на венерические болезни, больных соматическими заболеваниями и др.

Существует несколько вариантов микрореакций — VDRL, CMF, RPR и др. отличаю­щихся друг от друга в основном применяемым антигеном

Реакция Вассермана с кардиолипиновым и трепонемным

Реакция Вассермана с кардиолипиновым и трепонемным антигенами в норме отрица­тельная.

Реакцию Вассермана (РВ) применяют для диагностики всех форм сифилиса, контроля за эффективностью лечения, обследования лиц, имевших половой контакт с больным сифи­лисом, лиц с клиническим и анамнестическим подозрением на сифилис, а также при профи­лактическом обследовании на сифилис больных психиатрических и неврологических стаци­онаров, доноров и беременных, в том числе лиц, направляемых на искусственное прерыва­ние беременности.

При первичном сифилисе РВ в большинстве случаев не имеет большого диагностичес­кого значения, так как распознавание заболевания, как правило, проводят на основании клинических данных и исследования на бледную спирохету. Однако при выявлении поджив­ших язв неясной этиологии, когда в большинстве случаев бледную спирохету найти не удает­ся, РВ имеет большое значение.

Если данные РВ в первичном периоде заболевания сифилисом менее важны для диа­гностики, то для установления длительности срока лечения и сроков наблюдения они имеют исключительно важное значение. В первые 15—17 дней после появления твердого шанкра РВ обычно отрицательная. В дальнейшем она переходит в положительную, причем процент положительных результатов возрастает с увеличением срока, прошедшего с начала появле­ния шанкра до момента повторного исследования крови.

В первые 5—6 нед заболевания РВ положительна в 0,25 %, на 7—8-й неделе — в 75—80 %, а на 9—10-й неделе — в 100 % случа­ев . Деление первичного сифилиса на серонегативный (РВ от­рицательная) и серопозитивный (РВ положительная) имеет большое значение для определе­ния длительности лечения.

Если больных, начавших лечение при первичном серонегативном сифилисе, снимают с учета после полноценного лечения и годичного диспансерного наблю­дения, в течение которых в первые 6 мес РВ назначают ежемесячно, а затем один раз в квар­тал, то при первично серопозитивном сифилисе больных снимают с учета только после пол­ноценного лечения и 3 лет последующего наблюдения.

При вторичном сифилисе РВ положительна почти в 100 % случаев. Отрицательные ре­зультаты РВ при свежем нелеченном вторичном сифилисе наблюдаются очень редко. При вторичном рецидивном сифилисе РВ положительна в 98—100 % случаев. Следует отметить, что у истощенных лиц при так называемом злокачественном сифилисе и моносимптомных проявлениях вторичного рецидивного сифилиса РВ может быть отрицательной.

При третичном сифилисе РВ положительна у 70—75 % больных .

Наибольшее значение РВ имеет при скрытом сифилисе, так как какие-либо наружные проявления сифилиса в это время отсутствуют. В скрытом периоде сифилиса РВ быва­ет положительной в 40—96 % случаев в зависимости от длительности заболевания, интен­сивности предшествующей терапии и т.д. Диагностическое значение имеют только по­ложительные результаты реакции, отрицательные же роли не играют. Необходимо по­мнить, что в последние годы наблюдается рост заболеваемости скрытым сифилисом во всех странах.

Причины и симптомы сифилиса

Сифилис представляет собой хроническое венерическое заболевание, которое имеет инфекционный характер.

Данная болезнь может поражать различные ткани человеческого организма, в том числе кожные покровы, слизистую оболочку, внутренние органы, хрящевые ткани, нервы.

Возбудителем заболевания является бледная спирохета. Помимо этого, спровоцировать развитие болезни могут трепонемы, которые отличаются высокой проникающей способностью и могут проходить через слизистые оболочки.

Важной особенностью сифилиса является то, что он заразен для окружающих. Передача происходит, как правило, половым путем при незащищенном половом акте. Кроме этого, инфицирование может происходить при попадании пота или слюны на слизистые оболочки, при переливании крови, через предметы личной гигиены и другие бытовые объекты.

Основные симптомы сифилиса:

• Появление твердых шанкров в районе половых органов
• Изменение цвета кожи
• Гнойные выделения из половых органов
• Образование кондилом
• Анемия
• Общее недомогание

Важно отметить, что симптомы заболевания проявляются не сразу после заражения. В большинстве случаев протекает инкубационный срок, который может длиться до 2-3 недель. Симптоматика заболевания часто зависит от локализации инфицированного места.

При отсутствии своевременного лечения сифилис переходит на поздние стадии, при которых поражение приобретает обширный характер. У больного могут деформироваться зубы, кости.

Негативному воздействию подвергаются внутренние органы, что впоследствии может спровоцировать их дисфункцию и летальный исход.

В целом, сифилис является одним из самых распространенных венерических заболеваний, которое характеризуется длительным течением и множество неприятных для пациента симптомов.

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном: описание, основные показания, подготовка к процедуре

Процедура микроприципитации — эффективный метод диагностирования сифилиса

Представленная процедура направлена на выявление антител к кардиолипиновым антигенам, выделяемым из бледной спирохеты – возбудителя сифилиса.

Данный диагностический метод является первичным и в большинстве случаев используется для установления факта инфицирования.

В дальнейшем используются вспомогательные процедуры, направленные на определение оптимального способа лечения.

В настоящий момент процедура микроприципитации используется в комплексе диагностических процедур не только при сифилисе, но и в ходе проведения регулярных осмотров.

Показания к проведению процедуры:

• Наличие выраженных симптомов сифилиса
• Случаи незащищенного полового акта с зараженным партнером
• Планирование беременности
• Использование донорской крови
• Случаи заболевания сифилисом или других половых инфекций
• Контроль эффективности лечения

Процедура имеет широкий спектр показаний и часто назначается лицам, чья профессиональная деятельность связана с регулярными контактами с другими людьми. Диагностика может проводиться у детей, в том случае если их мать или отец были больны сифилисом до их рождения.

Проведение реакции микропреципитации назначается черездней после появление первых шанкров. Повторный тест делается через 3-5 недель с момента предположительной даты инфицирования организма. При позднем сифилисе применение описанной процедуры является нецелесообразной ввиду того, что реактивность антигенов существенно снижается.

Для выполнения РМП в лабораторных условиях смешивают материал, предварительно забранный у пациента. При таком методе используется сыворотка крови. Ее смешивают с раствором кардиолипиновых антигенов, смешанным с холин-хлоридом. В случае, если тест положительный, в веществе наблюдается выпадение хлопьев разных размеров. При отсутствии сифилиса реакция на кардиолипиновый антиген отсутствует.

В целом, РМП – это процедура, необходимая для определение реакции на антитела, выделяемые возбудителями сифилиса, что свидетельствует о наличии инфекции в организме.

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном на сифилис в норме отрицательная.

Микрореакция преципитации позволяет выявить антитела к кардиолипиновому антигену бледной спирохеты. Микрореакция преципитации при изолированном применении служит не диагностическим, а отборочным тестом, в связи с чем на основании её позитивности диагноз сифилиса не устанавливают, а пациенту проводят диагностические тесты (РСК, ИФА). С помощью микрореакции преципитации обследуют лиц, подлежащих периодическим медицинским осмотрам на венерические заболевания, больных соматическими заболеваниями и др.

Существует несколько вариантов микрореакций — VDRL (Venereal Disease Research Laboratory), TRUST (Toluidine Red Unheated Serum Test), RST (Reagin Screen Test), RPR (repid plasma reagin) и др. RPR-тест (МР плазмы с кардиолипиновым антигеном) бывает положительной в 78% случаев при первичном, в 97% — при вторичном сифилисе. VDRL-тест (МР инактивированной сыворотки с кардиолипиновым антигеном) положителен при первичном сифилисе в 59-87% случаев, при вторичном — в 100%, при позднем латентном — в 79-91%, при третичном — в 37-94%. Микрореакция преципитации обычно отрицательны в первые 7-10 дней после появления твёрдого шанкра.

В случае положительных результатов VDRL, RPR-тестов можно определить титр реагиновых антител. Высокий титр (более 1:16) обычно указывает на активный процесс, низкий титр (менее 1:8) — на ложноположительный результат исследования (в 90% случаев), а также возможен при позднем или позднем латентном сифилисе.

Исследование титра антител в динамике используют для оценки эффективности лечения. Снижение титра указывает на положительный ответ на проводимое лечение. Адекватное лечение первичного или вторичного сифилиса должно сопровождаться 4-кратным снижением титра антител к 4-му месяцу и 8-кратным — к 8-му месяцу. Лечение раннего латентного сифилиса обычно приводит к концу года к отрицательной или слабоположительной реакции. Подъём титра в 4 раза указывает на рецидив, реинфекцию или неэффективность терапии и приводит к необходимости повторного курса лечения. При вторичном, позднем или латентном сифилисе низкие титры могут сохраняться у 50% пациентов дольше 2 лет, несмотря на снижение титра. Это не указывает на неэффективное лечение или реинфицирование, так как эти пациенты остаются серологически положительными, даже если повторить курс лечения. Следует учитывать, что изменения титров при позднем или латентном сифилисе часто непредсказуемы, оценка эффективности лечения по ним затруднительна.

Чтобы отдифференцировать врождённый сифилис от пассивного носительства материнской инфекции, новорождённым необходимо провести серию исследований с определением титра антител: подъём титра в течение 6 мес после рождения свидетельствует о врождённом сифилисе, в то время как при пассивном носительстве антитела исчезают к 3-му месяцу.

При оценке результатов VDRL и RPR-тестов у детей грудного возраста с врождённым сифилисом необходимо помнить о феномене прозоны. Сущность этого феномена состоит в том, что для агглютинации антигены и антитела в этих реакциях необходимо, чтобы антигены и антитела находились в крови в соответствующем количестве. Когда количество антител значительно превышает количество антигенов, агглютинации не происходит. У некоторых детей грудного возраста с врождённым сифилисом содержание антител в сыворотке настолько велико, что в неразбавленной сыворотке не происходит агглютинации антител и нетрепонемных антигенов, используемых для диагностики сифилиса (тесты VDRL и RPR нереактивны). Поэтому у детей, обследуемых с целью диагностики врождённого сифилиса, возможен феномен прозоны. Во избежание ложноотрицательных результатов в таких случаях необходимо проводить исследования с разведением сыворотки и без него.

Микрореакция VDRL может быть негативной при раннем, позднем латентном и позднем сифилисе приблизительно в 25% случаев, а также у 1% больных вторичным сифилисом. В таких случаях необходимо использовать метод ИФА.

Ложноположительная реакция микропреципитации возможна при ревматических заболеваниях (например, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, склеродермия), инфекциях (мононуклеоз, малярия, микоплазменная пневмония, активный туберкулёз, скарлатина, бруцеллёз, лептоспироз, корь, эпидемический паротит, венерическая лимфогранулёма, ветряная оспа, трипаносомоз, проказа, хламидиоз), беременности (редко), в старческом возрасте (около 10% людей в возрасте старше 70 лет могут иметь ложноположительную микрореакцию преципитации), при хроническом лимфоцитарном тиреоидите, гемобластозах, приёме некоторых гипотензивных средств, наследственной или индивидуальной особенности.