Бактериология.
Квалификационные тесты (2019 год) с ответами — часть 3

.. 1 2 3 4 ..



Тема 3. Санитарная бактериология

3.001. Бактериальная обсемененность воздуха закрытых помещений больше

а) зимой

б) весной

в) летом

г) осенью

3.002. Основными признаками, которым должны отвечать СПМО, следует считать все, кроме:

а) постоянного выделения в окружающую среду в достаточном количестве из организма человека и теплокровных животных

б) способность длительно выживать в окружающей среде

в) способности к росту на простых средах, типичность свойств

г) способности к росту на сложных средах и к росту при температуре 20оС

3.003. Аутохтонная микрофлора воды поверхностных водоемов представлена всем, кроме

а) бациллами

б) кокками

в) извитыми формами

г) патогенными энтеробактериями

3.004. Цели и задачи санитарной бактериологии заключаются во всем следующем, кроме:

а) в ранней и быстрой индикации бактериального загрязнения объектов окружающей среды

б) в проведении мероприятий по снижению и предупреждению инфекционной заболеваемости

в) в использовании чувствительных, унифицированных методов исследования для получения достоверных и показательных результатов исследования

г) в изучении микрофлоры окружающей среды, участвующей в процессах самоочищения

3.005.Санитарная микробиология создана на стыке следующих наук:

а) микробиологии, эпидемиологии и иммунологии

б) микробиологии, гигиены и эпидемиологии

в) микробиологии, гигиены и иммунологии

г) микробиологии и иммунологии

3.006.Санитарную микробиологию не используют для:

а) ранней и быстрой индикации бактериального загрязнения объектов окружающей среды

б) проведения мероприятий по снижению и предупреждению инфекционной заболеваемости

в) изучения закономерностей эпидемического процесса

г) разработки методов контроля состояния объектов окружающей среды

3.007. К СПМО воды не относят:

а) ОКБ

б) термотолерантные колиформные бактерии

в) коли-фаги

г) гемолитические стрептококки

3.008. В соответствии с ГОСТом Р51232-98 в питьевой воде централизованного водоснабжения общие и термотолерантные колиформные бактерии не должны обнаружиться в

а) 10 мл

б) 100 мл

в) 1000 мл

г) 300 мл

3.009. Назовите приборы, используемые для отбора проб воды с глубины

а) аппарат Кротова

б) пробоотборник аэрозольный бактериологический (ПАБ-01)

в) батометр

г) аппарат Зейтца

3.010. При плановом определении в питьевой воде колиформных бактерий преимущество отдают методу исследования:

а) прямому посеву на среду Эндо

б) титрационному

в) мембранной фильтрации

г) микроскопическому

3.011. При определении колиформных бактерий в питьевой воде методом мембранных фильтров первичный посев проводят на среду

а) Эндо

б) ГПС

в) ЖСА

г) Сабуро

3.012. Вода может служить фактором передачи для всех возбудителей инфекционных заболеваний, кроме:

а) брюшного тифа, дизентерии

б) холеры

в) вирусных гепатитов А и Е

г) коклюша

3.013. Назовите с эпидемиологической точки зрения наиболее опасные для человека вирусы, загрязняющие водоемы:

а) вирусы гепатита В

б) риновирусы

в) ротавирусы

г) вирусы папилломы

3.014. Содержание, каких вирусов в питьевой воде централизованного водоснабжения нормируется санитарными нормами и правилами?

а) коли-фаги

б) вирус гепатита А

в) вирус гепатита В

г) полиовирусы

3.015. Бактериальные вирусы, способные лизировать кишечную палочку и формировать зоны лизиса (бляшки) через 18 ч при температуре 37С на питательном агаре, называются:

а) коли-фаги

б) колицины

в) колиформы

г) колибактерины

3.016. Микробиологические нормативы качества питьевой воды в соответствии с СанПиН2.1.41074-01 предусматривают отсутствие коли-фагов в:

а) 10 мл

б) 100 мл

в) 1000 мл

г) 1 мл

3.017. Определение синегнойной палочки проводят при плановом санитарно-микробиологическом исследовании:

а) воды питьевой

б) сточных вод

в) воздуха атмосферного и воздуха ЛПУ и родовспомогательных учреждений

г) предметов обихода, оборудования ЛПУ

3.018. Определение токсинов C.botulinum, C.perfringens, стафилококкового энтеротоксина проводят при санитарно-микробиологическом исследовании:

а) воды

б) предметов обихода

в) отдельных пищевых продуктов в плановом порядке

г) большинства пищевых продуктов по эпидемическим показаниям

3.019. Санитарно-показательные микроорганизмы должны удовлетворять следующим обязательным требованиям, кроме:

а) постоянства обнаружения в исследуемых объектах окружающей среды

б) достаточной численности

в) способности к росту на простых питательных средах

г) способности к росту на сложных питательных средах

3.020. Воздух – основной фактор передачи для всех заболеваний, кроме:

а) гриппа, кори

б) туберкулеза

в) клостридиозов

г) коклюша, дифтерии

3.021. Назовите объект окружающей среды, наиболее значимый в распространении вирусов и инфицировании ими людей:

а) атмосферный воздух

б) воздух закрытых помещений

в) питьевая вода и поверхностные водоемы

г) почва

3.022. На каком принципе основан метод Коха при санитарно-микробиологическом исследовании воздуха?

а) осаждение воздуха на чашках с агаром

б) использование специальных приборов

в) мембранной фильтрацией

г) все перечисленное

3.023. Для выделения стафилококков из воздуха используют питательные среды:

а) МПА

б) ЖСА, мясной желточно-солевой агар (МЖСА)

в) Эндо, висмут-сульфитный агар

г) Китт-Тароцци, глюкозо-кровяной

3.024. При санитарно-бактериологическом исследовании воздуха для определения общей микробной обсемененности первичный посев проводят на питательную среду:

а) МПА

б) ЖСА, мясной желточно-солевой агар МЖСА

в) Эндо

г) кровяной агар

3.025. Почва, как фактор передачи, играет основную роль при всех инфекциях, кроме:

а) столбняка

б) раневой анаэробной инфекции

в) дифтерии

г) ботулизма

3.026. При санитарном анализе почвы определяют все показатели, кроме:

а) общего количества сапрофитов

б) колиформных бактерий

в) энтерококков

г) патогенных энтеробактерий

д) энтеровирусов

3.027. Укажите характер загрязнения почвы при наличии в ней большого количества энтерококков и колиформных бактерий:

а) свежее фекальное

б) давнее фекальное

в) органическое

г) неорганическое

3.028. При текущем санитарном надзоре за предприятиями общественного питания и торговли исследование смывов проводят на присутствие:

а) колиформных бактерий

б) золотистого стафилококка

в) протеев

г) сальмонелл

3.029. Патогенные микроорганизмы, для которых предметы обихода могут служить фактором передачи, — все, кроме:

а) микобактерий

б) сальмонелл

в) шигелл

г) трепонем

3.030. При исследовании смывов с предметов окружающей среды в ЛПУ выделена культура грамотрицательных подвижных палочек, оксидазоположительных, с характерным запахом земляничного мыла и сине-зеленым пигментом. Это микроорганизмы предположительно относятся к виду:

а) P.aeruginosa

б) E.coli

в) P.vulgaris

г) L.monocytogenes

3.031. Молоко и молочные продукты – один из основных факторов передачи человеку всех инфекций, кроме:

а) сальмонеллезов, шигеллезов

б) бруцеллеза

в) сыпного тифа

г) клещевого энцефалита, ящура, лихорадки Ку

3.032. Определение ботулинического токсина в пищевых продуктах проводят с помощью:

а) посева в питательные среды

б) реакции нейтрализации на котятах

в) реакции нейтрализации на мышах

г) реакции иммунофлюоресценции

3.033. При исследовании баночных консервов первичный посев для выделения мезофильных анаэробов проводят на среду:

а) Китт-Тароцци

б) Кесслер

в) Эндо

г) Сабуро

3.034. При расследовании причин пищевых отравлений посевы исследуемого материала проводят:

а) только в накопительные среды

б) одновременно на несколько сред (накопительных и элективно-селективных) для обнаружения различных видов возбудителей, используя количественный метод посева

в) только в дифференциально-диагностические среды для идентификации возбудителя по ферментативным свойствам

г) на общие питательные среды, используя количественный метод посева

3.035. К критериям диагностики пищевых отравлений микробной этиологии относят все, кроме:

а) выделение из пищевого продукта массивного количества определенного вида потенциально патогенных микроорганизмов

б) выделение идентичного микроорганизма из патологического материала от группы пострадавших

в) нарастания титров антител в сыворотке крови пострадавших к подозреваемому микроорганизму

г) выделения условно-патогенных микроорганизмов в количестве 10— 10/мл из исследуемого материала

3.036. Пищевые отравления могут вызывать все микроорганизмы, кроме:

а) золотистых стафилококков

б) синегнойной палочки, протеев

в) нейссерий

г) клостридий, B.cereus

3.037. Санитарно-показательными микробами для воды являются:
а) стрептококки
б) вирусы
в) кишечные палочки
г) вибрионы
д) микоплазмы

3.038. Коли-титр водопроводной воды должен быть:
а) больше 333
б) меньше 333
в) 333
г) 111
д) меньше 111

3.039. Санитарно-показательными микробами для почвы являются:
а) вирусы
б) стафилококки
в) микоплазмы
г) сардины
д) клостридии

3. 040. При выделении патогенных микроорганизмов из внешней среды учитывают все, кроме:

а) количества в исследуемом объекте

б) способности к росту на простых питательных средах

в) способности к росту на сложных питательных средах

г) сроков выделения

3.041. Принципы оценки гигиенического состояния объектов внешней среды по бактериологическим показателям заключаются во всем, кроме:

а) определения микробного числа

б) определения индекса санитарно-показательных микроорганизмов

в) выбора тестов в зависимости от поставленных задач

г) индикации патогенности микрофлоры

3.042. К БГКП относят:

а) все энтеробактерии

б) только эшерихии

в) представителей нескольких родов энтеробактерий

г) только токсигенные эшерихии

3.043. Коли-фаги являются:

а) бактериальными вирусами

б) энтеровирусами

в) бактериями

г) простейшими

3.044. Навеска пищевого продукта при исследовании на листерии:

а) 25 г (мл)

б) 200 г (мл)

в) 1 г (мл)

г) 300 г (мл)

3.045. Для культивирования В.сеrеus применяется среда:

а) Донована

б) Плоскирева

в) Серова

г) Сабуро

3.046. Условия культивирования С.perfringens:

а) 37 °С 48-72 часа

б) 43° С18-24 часа

в) 22°С 72 часа

г) 22°С 5 суток

3.047. Цвет колоний С.perfringens в среде, используемой для выделения

а) чёрный

б) жёлтый

в) белый

г) малиновый

3.048. При расследовании пищевого отравления пробы продуктов исследуют в количестве:

а) любом

в) 200 г

б) 500 г

г) 1 кг

3.049. Режим термостатирования при исследовании на стерильность на тиогликолевой среде:

а) 30-35°С 14 суток

б) 40-42°С 10 суток

в) 20-22°С 14 суток

г) 20-22°С 1 сутки

3.050. Режим термостатирования при исследовании на стерильность на среде Сабуро

а) 20-22°С 14 суток

б) 35-37°С -14 суток

в) 20-22°С 7 суток

г) 20-22°С 1 сутки

3.051. Для выделения грибов и дрожжей используют среду

а) Чистовича

б) Сабуро

в) Эндо

г) пептонную воду

3.052. Подготовка среды Вильсона-Блера к посеву включает:

а) охлаждение среды

б) подогрев среды до 37° С

в) регенерацию в течение 40 минут до 80° С

г) подогрев среды до 20° С

3.053. Объемы питьевой воды, засеваемые для выделения клостридий

а) 20 мл

б) 100 мл

в) 50 мл

г) 500 мл

3.054. Для проведения анализа хлорированной воды в сосуд объемом 500 мл вносят:

а) 10 мг гипосульфита натрия

б) 10 мл едкого натрия

в) 10 мл соляной кислоты

г) 100 мл соляной кислоты

3.055. При исследовании питьевой воды на БГКП на среде Эндо учитываются варианты колоний:

а) темно-красные с металлическим блеском

б) бесцветные

в) пленчатые

г) желтые

3.056. Средой накопления для сальмонелл в объектах окружающей среды является:

а) пептонная вода

б) среда Кесслера

в) магниевая среда

г) МПБ

3.057. Значение аббревиатуры КМАФАнМ

а) количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов — общее микробное число

б) общее микробное число

в) анаэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы

г) анаэробные и аэробные микроорганизмы

3.058. Для определения КМАФАнМ подсчитываются колонии следующих вариантов:

а) мелкие на поверхности агара

б) крупные на поверхности агара

в) все колонии на поверхности и в глубине агара

г) мелкие и крупные на поверхности агара

3.059. Для определения промышленной стерильности консервы вместимостью до 1 л термостатируют:

а) 5 суток

г) 10 суток

в) 3 суток

г) 1 сутки

3.060. В случае исследования продуктов с резко кислой реакцией их

а) разводят физраствором

б) подщелачивают

в) увеличивают срок инкубации

г) уменьшают срок инкубации

3.061. Для удаления газа при исследовании напитков необходимо:

а) термостатирование при 43°С 1 час

б) применение сорбентов

в) термостатирование при 25°С 2 часа

г) термостатирование при 25°С 8 часов

3.062. Для определения в консервах мезофильных аэробов используют:

а) мясо-пептонный бульон с 1% глюкозой

б) желчный бульон

в) селенитовый бульон

г) среду Мюллера

3.063. В 1 мл исходного разведения (1:10) пробы пищевого продукта содержится:

а) 0,1 г

б) 1 г

в) 10 г

г) 5 г

3.064. Вода открытых водоемов для исследования на холерный вибрион доставляется в количестве:

а) 0,5 л

б) 1,5 л

в) 1,0 л

г) 300 мл

3.065. Объектами внешней среды для исследования на холеру являются:

а) вода поверхностных водоемов, водопроводная вода, хозяйственно — бытовые сточные воды, гидробионты, пищевые продукты, смывы с объектов внешней среды и мухи

б) почва, смывы с объектов внешней среды, питьевая вода, вода открытых водоемов, вода плавательных бассейнов

в) вода поверхностных водоемов, водопроводная вода, хозяйственно — бытовые сточные воды, почва, гидробионты, пищевые продукты.

г) вода поверхностных водоемов, водопроводная вода.

3.066. Для определения микробного числа воздуха используют:

а) аппарат Кротова

б) сухожаровой шкаф

в) фильтр Зейтца

г) автоклав

3.067. Государственная санитарно-эпидемиологическая служба – это:

а) единая система органов, учреждений, действующих в целях охраны здоровья населения и профилактики заболеваний человека

б) единая система органов и учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор

в) единая система органов, учреждений и предприятий, независимо от их подчиненности, осуществляющих мероприятия по сохранению и укреплению здоровья людей и профилактике заболеваний человека

г) служба предприятий, осуществляющих мероприятия по профилактике заболеваний

3.068. Структура бактериологической службы России включает все, кроме:

а) бактериологических лабораторий центров санэпиднадзора

б) бактериологических лабораторий лечебно-профилактических учреждений (больниц и диспансеров)

в) ведомственных (производственных)бактериологических лабораторий

г) бактериологических лабораторий особо опасных инфекций

3.069. Основными задачами бактериологической службы России являются:

а) проведение профилактических исследований и исследований по эпидпоказаниям

б) проведение диагностических исследований

в) проведение санитарно — бактериологических исследований

г) все перечисленное

3.070. Санитарную микробиологию используют для:

а) ранней и быстрой индикации бактериального загрязнения объектов окружающей среды

б) проведения мероприятий по снижению и предупреждению инфекционной заболеваемости

в) изучения закономерностей эпидемического процесса

г) разработки методов контроля состояния объектов окружающей среды

3.071. Основными признаками, которым должны отвечать СПМО, следует считать все, кроме:

а) постоянного выделения в окружающую среду в достаточном количестве из организма человека и теплокровных животных

б) способности длительно выживать в окружающей среде

в) способности к росту на простых средах, типичности свойств

г) способности к росту на сложных средах и к росту при температуре 20°С

ответы

ОБСЕМЕНЕННОСТИ ВОЗДУХА

Вместе с пылью в воздухе содержатся различные микроорганизмы, количество которых зависит от сезонов года, технологических процес­сов, вида животных и других факторов. В воздух могут попадать патогенные микроорганизмы, которые, распространяясь на десятки, сотни метров, могут вызывать различные инфекционные заболевания (аэро­генная инфекция).

Все методы определения бактериальной обсемененности сводятся в основном к определению количества микро­бов в единице объема воздуха. Определение концентрации бактери­альных частиц в воздухе дает возможность оценить эпизоотическую обстановку, необходимость проведения тех или иных оздоровительных мероприятий. В дополнение нередко определяют наличие отдельных патогенных микробов, которые могут служить санитарными показате­лями загрязнения воздуха и давать представление об источниках бак­териального загрязнения.

Важнейшее условие определения концентрации бактериальных аэ­розолей — правильно выбранный метод отбора проб воздуха. Большин­ство существующих методов основаны на принципе либо засасывания (аспирации) частиц в какой-нибудь прибор, либо на осаждении их на различных поверхностях, либо сочетании этих двух принципов — аспи­рации с последующим осаждением. Для количественного определения микроорганизмов в настоящее время используют разные методы.

Метод свободного осаждения микроорганизмов на питательные среды. В чашки Петри в стерильных условиях наливают питательную среду (чаще всего мясопептонный агар), выставляют в место исследо­вания на 5-10 мин, после чего закрывают и ставят в термостат при температуре 37 0С на 48 ч. Затем подсчитывают выросшие колонии микробов и делают расчет. За 5 мин на поверхность чашки Петри площадью 100 см2 успевает оседать такое количество микроорганизмов, которое содержится в 10 л возду­ха.

Пример расчета: На чашке Петри площадью 56 см2 выросло 150 колоний микроорганизмов. Узнаем, сколько микроорганизмов выросло бы на пло­щади 100 см2 с помощью пропорции: 56—150

100—х х = (100х150)/56 = 267.

Следовательно, на чашке Петри площадью 100 см2 выросло 267 микроорганизмов. Далее делаем перерасчет на 1 м3.

10 л —267

1000 —х х = (1000-267)/10 = 26700.

Таким образом, в 1 м3 воздуха содержится 26 700 микроорганизмов. Однако надо заметить, что этим методом можно определить пример­ную концентрацию микроорганизмов.

Метод осаждения микроорганизмов на питательные среды с помощью аппарата В.А.Кротова (прибор для бактериологического анализа воздуха). Аппарат Кротова представляет собой цилиндр, закрываемый сверху съемной крышкой, под которой над вращающимся от турбулентного потока воздуха столиком устанавливается чашка Петри с питательной средой. Внутри прибора помещается электрический мотор с центро­бежным вентилятором высокого давления, обеспечивающий аспира­цию воздуха и вращение столика с чашкой Петри. Внутрь прибора воз­дух попадает через клиновидную щель, расположенную по радиусу чашки Петри. Проходя через щель с большой линейной скоростью, воздух ударяется о поверхность питательной среды в чашке Петри; на эту среду осаждаются взвешенные в воздухе микроорганизмы. Количе­ство пропускаемого воздуха (в литрах) учитывается с помощью ротометра.

При подготовке прибора к работе отбирают стандартные чашки Петри диаметром 10 см и заблаговременно заполняют их питательной средой в количестве не более 15 мл. В зависимости от предполагаемой бактериальной загрязненности воздуха через прибор пропускают 25-100 л воздуха. После этого чашки Петри вынимают, закрывают крышка­ми и ставят в термостат при температуре 37°С на 48 ч, а затем подсчи­тывают выросшие колонии и делают расчет.

Пример расчета. Через прибор было пропущено 100 л воздуха. На чашке Петри выросло 300 колоний. Рассчитываем, сколько микроорга­низмов будет содержаться в 1 м3 воздуха: 100 л —300

1000 л —х х = (1ОО0хЗО0)/100 = 30ОО.

Следовательно, в 1 м3 воздуха содержится 3000 микроорганизмов.

Метод Дьяконова. Через склянку типа Дрекселя со 100 мл сте­рильного физраствора и стеклянными бусами на дне просасывают с помощью аспиратора 10-20 л воздуха при частом встряхивании для лучшего раздробления крупных аэрозольных частиц. Затем абсорбент высевают на чашки Петри с мясо-пептонным агаром, ставят их на 48 ч в термостат при температуре 37°С и после этого подсчитывают вы­росшие колонии с последующим пересчетом количества микробов на 1 м3 воздуха.

Некоторые виды микробов, выделенных из воздуха, определяют путем пересева выросших на агаре колоний на соответствующие избирательные среды с последующим изучением их морфологических и других особенностей.

Метод Речменского. Исследование проводят с помощью прибо­ра, который представляет собой стеклянный цилиндр длиной 20 см и диаметром 2-2,5 см с резервуаром емкостью 5 мл. Внутрь цилиндра вмонтирована воронка, куда подходит под прямым углом капиллярная трубка, нижний конец которой опущен в резервуар, заполняемый физраствором или питательным бульоном в количестве 3-5 мл. Противо­положный конец цилиндра соединяется с аспиратором.

При включении аспиратора струя засасывающего воздуха пульверизует жидкость, находящуюся в резервуаре, а образующиеся при этом капельки осаждаются на внутренних стенках цилиндра и снова стекают в резервуар. Таким образом, с помощью питательной среды можно сконцентрировать в резервуаре микрофлору, содержащуюся в аспирируемом воздухе. После отбора пробы берут 0,3-0,5 мл поглотительной жидкости и делают ею посев на питательные среды, которые помеща­ют в термостат при температуре 37°С на 48 ч. Затем подсчитывают колонии с последующим перерасчетом на 1 м3 воздуха.

Метод улавливания бактерий с помощью фильтров и жидкостей. Улавливание микроорганизмов проводят с помощью специальных фильтров и жидкостей, через которые пропускают опре­деленное количество воздуха. Затем из фильтра все смывают физрас­твором и высевают на питательные среды. Если используют жидкость (чаще всего физраствор), то после исследования из нее также делают посев на питательные среды. После выдерживания питательных сред с посевами в термостате при температуре 37°С подсчитывают выросшие колонии. Затем делают перерасчет количества микроорганизмов на 1 м3 воздуха.

Метод определения бактерицидного действия ультрафиолетовых лучей. Для определения бактерицидного действия ультрафиоле­товых лучей используют чашки Петри с мясопептонным агаром, на которые посеяли микробы. Эти чашки облучаются различны­ми источниками ультрафиолетового излучения, чаще всего бак­терицидными ультрафиолетовыми лампами (БУВ-15 или БУВ-30).

Техника облучения. Открытые чашки Петри, на ко­торых сделан посев микробов из воздуха, размещают под ульт­рафиолетовыми лучами на различных расстояниях (0,5 и 1 м) и облучают в течение 2 мин. После этого чашки Петри закрывают и ставят в термостат на 48 ч при температуре 370С. Для контроля в термостат ставят чашки Петри, не облученные ультрафиолетовыми лучами, на которые таким же образом был сделан посев мик­робов.

Во всех чашках Петри подсчитывают количество выросших колоний и определяют разность их в облученных и необлученных чашках. По этой разнице судят об эффективности бактери­цидного действия ультрафиолетовых лучей.

Выросшие колонии можно подсчитывать с помощью спе­циального прибора. Он состоит из корпуса, на котором вмонтирован круглый столик, предназначенный для чашек Петри. Изнутри подсве­чивается светом, причем он может быть различного цвета, который проявляется с помощью светофильтров. От корпуса отходит гибкий металлический шланг, на конце которого монтируют обычную перье­вую авторучку (электроперо). При подсчете колоний микроорганизмов чашку Петри устанавливают на столик вверх дном, подбирают наибо­лее четкую подсветку и на каждой колонии микробов делают точку авторучкой. При нажатии в верхней части авторучки замыкается кон­такт, и счетчик, установленный в корпусе, подсчитывает колонии мик­роорганизмов. Для подсчета мелких колоний используют лупу.

Нормативы бактериальной обсемененности воздуха животноводче­ских и птицеводческих помещений составляют 30-220 тыс. микробных тел в 1 м3 воздуха.

Занятие 9. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОКИСЛЯЕМОСТИ ВОЗДУХА

В воздухе помещений для содержания животных и птицы, кроме вредных газов (СО2, NH3 и H2S), со­держится большое количество других дурно пахнущих газов, летучих органических кислот и различных углеводородов. Для суммарного оп­ределения органических веществ в воздухе применяют дихроматный метод И. П. Кругликовой, основанный на способности двухромовокис­лого калия окислять находящиеся в воздухе органические вещества. По количеству кислорода, потребленного на окисление органических веществ, су­дят о содержании последних. Для количественного выражения их пользуются условной величиной окисляемости воздуха, которую опре­деляют количеством кислорода в мг, израсходованного на окисление органических веществ, содержащихся в 1 м3 исследуемого воздуха.

Необходимые реактивы:

Поглотительный 0,25%-ный раствор двухромовокислого калия. Для его приготовления растворяют при подогревании 0,25 г дважды перекристаллизованного двухромовокислого калия в небольшом коли­честве серной кислоты (уд. вес 1,84) в стакане. Споласкивая стакан несколько раз кислотой, переливают содержимое в мерную колбу ем­костью 100 мл и доводят прибавлением серной кислоты до метки.

Раствор серноватистокислого натрия 0,01 н. Растворяют 2,481 г гипосульфита в 1 л дистиллированной воды, титр устанавливают по 0,1 н. раствору йода.

Раствор йодистого калия 50%-ный.

Раствор крахмала 1%-ный.

Отбор проб воздуха

Исследуемый воздух (20-30 л) просасывают со скоростью 8-9 л/ч через два последовательно соединенных малых поглотителя Полежае­ва, содержащих по 2 мл 0,025%-ного раствора двухромовокислого ка­лия. Поглотительный прибор Полежаева представляет собой стеклян­ный сосуд, в верхнем расширении которого имеются две трубки: длин­ная, доходящая до дна и служащая для впуска просасываемого возду­ха, и короткая, впаянная горизонтально и присоединяемая во время работы к аспиратору.

После просасывания воздуха поглотители доставляют в лаборато­рию и нагревают в водяной бане в течение часа с момента закипания воды. Одновременно ставят в баню два поглотительных прибора с чис­той бихроматной смесью (по 2 мл в каждом) для определения титра смеси (контроль).

Затем все поглотители охлаждают в воде и содержимое каждого из них переносят в коническую колбу с притертой пробкой, промывая поглотитель несколько раз дистиллированной водой. Затем добавляют в колбу 1 мл 5%-ного раствора иодистого калия, 0,1 мл раствора крах­мала и через минуту титруют 0,01 н. раствором гипосульфита до ис­чезновения синей окраски. Разница в титровании исследуемой и контроль­ной проб покажет степень окисляемсти воздуха.

Пример. Через поглотители пропущено 8 л воздуха при температу­ре 26°С и давлении 750 мм ртутного столба. Объем воздуха, приведен­ный к нормальным условиям, равен: (8х273х750)/ — 7,3 л.

При титровании жидкости из первого поглотителя израсходовано 4,3 мл 0,01 н. раствора гипосульфита, а из второго — 4,4 мл. На кон­трольные пробы пошло 9,3 и 9,4 мл 0,01 н. раствора гипосульфита. Искомая величина окисляемости воздуха равна:

/7,3 =54,8 мг/м3.

Величина 0,08 означает количество миллиграммов активного кислорода двухромовокислого калия, соответствующее 1 мл 0,01 н. раствора гипосульфита.

Для ускорения исследований методика И.П. Кругликовой была модифи­цирована МГАВМиБ им. К.И.Скрябина. Гро­моздкий аспиратор заменили литровой колбой, и в нее с помощью ша­ров Ричардсона закачивали исследуемый воздух, затем заливали 10 мл 0,25%-ного раствора двухромовокислого калия и встряхивали в тече­ние 30 мин на Шуттель-аппарате. Содержимое колбы переносили в пробирку. Остальные исследования проводили в соответ­ствии с основной методикой.

Данные модифицированного исследования отличаются от основно­го не более чем на 7-9%.

Определение биологической активности воздуха

Биологическую активность воздуха определяют длительностью жизни белых мышей в небольшом объеме (около 350 мл) исследуемого воздуха. Время жизни мышей в часах в герметически закупо­ренном сосуде с исследуемым воздухом делят на их массу в граммах и получают коэффициент биологической активности (КБА) воздуха.

Занятие 10. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ШУМОВ И ВИБРАЦИИ

Шум — это сочетание звуков различных частот и спектра интенсивностей. В гигиене к шумам относят нежелательное беспорядочное со­четание звуков. Воздействие шума на организм зависит от его громко­сти, определяемой спектральным составом (частотой входящих в него звуков) и силой шума. Сила звука обусловлена амплитудой колебания звуковой волны и определяется количеством звуковой энергии, прохо­дящей в 1 с через площадь 1 м2, расположенную перпендикулярно на­правлению распространения звуковой волны. Единица измерения -Вт/м3.

Для измерения интенсивности звука создана логарифмическая шка­ла уровней звукового давления с единицей измерения децибел (дБ) Ухо человека различает по громкости два звука, если они по уровню силы отличаются друг от друга на 1 дБ, т. е., на 12,4%. Слышимый диапазон включает в себя силу звука в пределах 0 — 140 дБ (болевой предел). Увеличение уровня звукового давления на каждые 10 дБ соот­ветствует увеличению громкости примерно в 2 раза.

Чувствительность анализатора слуха у домашних и сельскохозяйственных животных раз­лична и зависит от высоты звука и других факторов. Собаки способны воспринимать колебания в диапазоне 38- 80 000 Гц, овцы — 20-20 000 Гц. Достаточной остротой слуха обладает также крупный рогатый скот, который может дифференцировать весьма близкие по тембру звучания тоны.

По распределению звуковой энергии во времени различают шум постоянный и импульсный. Постоянным называют шум, уровень которого изменяется во времени не более чем на 5 дБ. Импульсный шум воспринимается как отдельные удары.

На современных животноводческих и птицеводческих предприятиях шумы возникают в результате звуков, издаваемых животными и птицей, работы технологического оборудования: механизмов и машин для подготовки кормов и их раз­дачи, уборки навоза, вентиляции помещений, доения коров. Могут иметь значение и внешние (по происхождению) шумы (при размеще­нии животноводческих помещений под воздушными трассами или вблизи аэродромов, железных дорог и т.п.).

Под влиянием шума в организме у коров происходят существенные физиологические изменения: учащаются дыхание, пульс, уменьшаются использование кислорода и уровень теплопродукции, снижаются час­тота жевательных движений и сокращений рубца, молочная продук­тивность. Шумовые раздражители в пределах 60-120 дБ снижают яй­ценоскость кур, приросты свиней и молодняка крупного рогатого ско­та, вызывая у животных повышение температуры тела, уменьшение количества эритроцитов и гемоглобина. Многие шумы можно отнести к чрезмерным раздражителям, которые вызывают беспокойство жи­вотных и появление у них стресса. Одно из самых пагубных последст­вий шума — нарушение сна. Животные переносят отсутствие сна тяже­лее, мучительнее, чем полное голодание. Акустический фон животноводческих ферм и птицеводческих предприятий изучен еще недоста­точно.

Профилак­тика шума в животноводческих помещениях предусматривает подгон­ку и настройку аппаратов, применение звукоизоляционных прокладок, чехлов, вынесение силовых агрегатов доильных машин, мощных вен­тиляторов в специальные помещения, камеры, изолированные от по­мещений для содержания животных и птиц.

В настоящее время для измерения уровня шума применяют шумомеры различных видов — Ш-63; Ш-ЗМ; Ш-71; ШМ-1. Наиболее распространен и удобен в работе для измерения уровня шума в животноводческих и птицеводческих помещениях малогабаритный шумомер ШМ-1.

Шумомер малогабаритный ШМ-1, состоящий из прибора измери­тельного ПИ-14 и капсюля микрофонного конденсаторного М-101, предназначен для измерения уровня звука и имеет частотные характе­ристики А и С. Принцип работы прибора заключается в том, что сигнал с капсюля поступает на прибор ПИ-14, проходя последова­тельно усиление, разделение, коррекцию, еще раз усиление, которое передается на детектор. С детектора сигнал поступает на показываю­щий прибор, отрегулированный в децибелах.

Под вибрацией принято понимать механические колебательные движения различных тел. Наиболее простой формой механических колебаний являются гармонические, когда тело повторяет одно и то же движение с возрастающей или убывающей величиной смещения. В производственных условиях, на транспорте, в быту встречаются слож­ные виды колебаний. В гигиенических исследованиях принято опреде­лять основные характеристики вибрации — частоту, амплитуду и их производные — виброскорость и ускорение. Частота колебаний (Т) -число колебаний за единицу времени. Единица частоты колебаний -Гц. Амплитуда колебаний (а) — максимальное отклонение колеблю­щейся точки от положения равновесия. Амплитуда колебаний выража­ется в см, мм, мкм.

Виброскорость (V) принято определять по ее максимальному зна­чению, которое находится в прямой зависимости от частоты и ампли­туды. Виброскорость выражают в см/с. Ускорение (W) выражают чаще всего в долях или единицах ускоре­ния сил тяжести, см/с2

В гигиенической практике используют приборы для регистрации вибрации: ИШВ-1 и НВА-1. Прибор НВА-1 преобразует механические колебания исследуемого объекта в пропорциональные им электриче­ские сигналы с последующим их усилением. Данный прибор позволяет определить виброскорость в относительных единицах (дБ). Пределы измерения общих и октавных уровней виброскорости от 70 до 130 дБ, частотный диапазон аппарату­ры 1,4-335 Гц.

Измерение вибрации и оценка ее физических параметров позволя­ют определить степень вредности работ, обосновать необходимость осуществления профилактических мероприятий по снижению вибра­ции при данном виде работы.

Микробиологические показатели воздуха

Воздух может содержать микроорганизмы, которые вызывают заболевания человека и загрязняют пищевые продукты.

В атмосферный воздух микроорганизмы попадают из почвы, с растений, тела человека и животных, с пылью и т.д. Воздух — неблагоприятная питательная среда для многих видов микроорганизмов, поэтому они только сохраняют в нем жизнеспособность определенное время, а некоторые из них довольно быстро погибают под действием солнечного света и дефицита влаги.

Атмосферный воздух, как правило, содержит сапрофитную микрофлору, количество которой уменьшается с высотой. Содержание микробов в воздухе зависит от климата, сезона года, времени суток, метеоусловий, санитарного состояния местности и др. Над морями и горными вершинами воздух почти стерильный — в 1м 3 воздуха насчитываются единичные клетки.

Наибольшее количество микроорганизмов содержится в воздухе закрытых помещений при большом скоплении людей, плохой вентиляции, при нарушении санитарного режима и личной гигиены. Уровень микробной загрязненности воздуха зависит также от вида перерабатываемой продукции и характера технологических операций. Так, при сортировке и фасовке овощей количество микробов в воздухе помещений увеличивается в сотни тысяч раз.

Воздух помещений может служить фактором передачи многих аэрогенных инфекций. Различаю два способа передачи:

· воздушно-капельный путь — микробное загрязнение воздуха происходит при выделении мельчайших частичек слюны, мокроты во время разговора, кашля, чихания. Так, при чихании образуется до 40 тысяч мельчайших капелек, распространяемых на расстоянии около 1,5 м. Микроорганизмы хорошо сохраняют свою жизнеспособность и вирулентность в капельках жидкости. Таким путем распространяются грипп, ангина, туберкулез, пневмония, дифтерия, корь, менингит и др.;

· воздушно-пылевой путь — микроорганизмы оседают на частицах пыли (пылебактериальная смесь). В таком состоянии одни возбудители заболеваний могут сохраняться в воздухе помещений 2-3 час (грипп, дифтерия), а некоторые- в течение 3-4 месяцев (туберкулез).

При санитарно-гигиенической оценке помещений определяют в воздухе общую микробную загрязненность (в 1 м3), содержание представителей верхних дыхательных путей — гемолитических стрептококков, наличие плесневых грибов и дрожжей.

Воздух закрытых помещений считается чистым, если количество микроорганизмов в 1 м3 не превышает 2000, а содержание гемолитических стреп-тококков — не более 10.

На предприятиях пищевой промышленности особое значение отводится выявлению санитарно-показательных микроорганизмов, возбудителей пищевых отравлений и порчи пищевых продуктов. В воздухе пищевых производственных цехов должно присутствовать не более 100-500 бактерий в 1м 3 в зависимости от характера производства.

Особое значение имеет воздух холодильных камер. Степень микробного обсеменения воздуха в них может достигать сотни тысяч и миллионы клеток в 1 м 3, что может инфицировать хранящиеся там продукты. Количество микроорганизмов в холодильных камерах возрастает при их неблагоприятном санитарном состоянии, а также с увеличением температуры и сроков хранения пищевых продуктов.

Воздух холодильных камер исследуют на загрязненность спорами мицелиальных грибов. Хорошим считается воздух камер, если общее количество спор грибов, осевших на чашку Петри за 5 мин, не превышает 10, удовлетворительным — 11-50, плохим — более 50. Для предотвращения развития микробов в камерах хранения необходимо регулярно проводить побелку и окраску стен и потолков, систематически мыть и дезинфицировать полы.

Для дезинфекции воздуха производственных помещений и холодильных камер используют дезинфицирующие вещества в виде аэрозолей, обработку воздуха двуокисью азота и молочной кислоты, а также озонирование и ультрафиолетовое облучение.

На предприятиях общественного питания и пищевой промышленности охрана воздушной среды помещений в целом и рабочих зон обеспечивается благоустройством и озеленением территории, своевременным удалением пищевых отходов, вентиляционными устройствами, применением современного теплового оборудования, запрещением применения холодильных установок, работающих на аммиаке.

Методика исследования

Общее микробное число (общее количество бактерий в 1 см3 воды) позволяет оценить уровень микробного загрязнения воды. Исследуемую воду вносят по 1 мл в стерильные чашки Петри с питательной средой и подсчитывают число выросших колоний. Данный показатель вычисляют путём суммирования среднего арифметического числа бактерий, дрожжей и плесневых грибов и выражают в КОЕ/мл.

Определение колиформных бактерий. Колиформные бактерии – это грамотрицательные неспорообразующие палочки, не обладающие оксидазной активностью и сбраживающие лактозу с образованием кислоты и газа при 37 оС в течение 24-48 часов. Термотолерантные колиформные бактерии сбраживают лактозу с образованием газа при 44,5 оС в течение 24 часов. Термотолерантные колиформные бактерии быстро отмирают во внешней среде, поэтому их обнаружение свидетельствует о свежем фекальном загрязнении воды.

Для определения колиформных бактерий в питьевой воде используют метод мембранных фильтров. Исследуемую воду (3 пробы по 100 мл) пропускают через бактериальные фильтры из нитроцеллюлозы, которые затем помещают на среду Эндо и инкубируют при 37 оС 24 часа. Подсчитывают количество выросших лактозоположительных колоний.

Определение коли-фагов (бактериофагов E. coli). Наличие фагов бактерий группы кишечных палочек является косвенным показателем возможного присутствия энтеровирусов в исследуемой пробе воды. Коли-фаги вызывают лизис E. сoli, что можно наблюдать по образованию зон лизиса (бляшек) на посеве бактериальной культуры. Исследуемую пробу воды (100 мл) нагревают до 35-44 оС и разливают по 20 мл в стерильные чашки Петри. Затем в каждую чашку заливают по 20 мл засеянного культурой E. сoli питательного агара и аккуратно перемешивают. Через 18 часов инкубации подсчитывают и суммируют все бляшки, образовавшиеся на чашках Петри. Таким образом, получают количество бляшкообразующих единиц (БОЕ) в 100 мл воды.

Санитарная оценка воздуха по микробиологическим показателям

Санитарно-микробиологические показатели воздуха нормируются в зависимости от типа и назначения помещения.

Исследование воздуха на наличие микроорганизмов осуществляют седиментационными или фильтрационными методами.

Седиментационный метод Коха основан на спонтанном оседании бактериальных частиц и капель под действием силы тяжести на поверхность питательной среды открытой чашки Петри. При этом читается, что в соответствии с формулой В.Л.Омелянского на поверхность плотной питательной среды в чашке Петри площадью 100 см2 за 10 минут оседает такое количество бактерий, которое содержится в 10 л воздуха.

При фильтрационных методах отбор проб воздуха осуществляется с помощью различных приборов и аппаратов. В частности при использовании аппарата Кротова отбор проб воздуха (по 100 л ) производится над двумя чашками Петри с мясо-пептонным агаром. Посевы культивируют 48 часов при 37 оС. После инкубации подсчитывают число колоний на питательной среде и вычисляют количество бактерий в исследуемом воздухе.

Основные показатели санитарного состояния воздуха:

  • ОМЧ воздуха – количество колониеобразующих единиц в 1 м3 воздуха;

  • присутствие золотистого стафилококка, α- и β- гемолитических стрептококков;

  • присутствие дрожжеподобных и плесневых грибов;

  • присутствие патогенных микроорганизмов.

  • В воздухе особо чистых помещений лечебных учреждений (операционных, родильных залов, боксов для ожоговых больных и недоношенных детей и т.п.) общее количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха не должно превышать 200 КОЕ. Золотистый стафилококк, α- и β- гемолитический стрептококк, дрожжеподобные и плесневые грибы должны отсутствовать.

Обеззараживание воздуха закрытых помещений проводят разными способами: УФЛ-аэроионизаторами, вентиляцией.

Контрольные вопросы по теме занятия:

1. Распространение микробов в природе.

2. Микрофлора почвы.

3. Микрофлора воды.

4. Микрофлора воздуха.

5. Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах.

6. Методы определения санитарно-показательных микроорганизмов.

Литература для подготовки к занятию:

Основная литература:

1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под ред. А.А. Воробьева. М., 2004.

Дополнительная литература:

1. Л.Б. Борисов. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2002.

2. О.К. Поздеев. Медицинская микробиология. М., ГЭОТАР-МЕДИА, 2005.

3. Медицинская микробиология. Справочник. Под ред. В.И. Покровского и О.К. Поздеева. М., ГЭОТАР-МЕД, 1998.

Санитарный контроль
в пищевой промышленности

Принято считать, что чем выше общая микробная обсемененность объекта внешней среды, тем больше вероятность присутствия в них патогенных бактерий.

Логическая обоснованность этого положения не вызывает сомнений, если его рассматривать в статистическом плане, тогда как во многих конкретных случаях оно может не соответствовать действительности. Например, несмотря на то, что молочнокислые продукты обильно обсеменены специфической микрофлорой, они являются не только полезными, но и обладают диетическими свойствами. И, напротив, незначительная обсемененность продукта или корма патогенными микробами в результату их использования может привести к тяжелым последствиям.

Попавшие на объект (субстрат) патогенные бактерии вступают с его микрофлорой в определенные взаимоотношения, часто антагонистические. Кроме того, и другие внешние факторы, например температура, рН среды, оказывают неблагоприятное действие на болезнетворные бактерии. В результате чего только в редких случаях они размножаются на субстрате или сохраняются в состоянии покоя, а гораздо чаще погибают. Опасность таких объектов для здоровья людей и животных зависит не только от степени обсеменения их болезнетворными микроорганизмами, но и от сроков, прошедших после заражения.

При определении общей микробной обсемененности воды, воздуха, пищевых продуктов необходимо учитывать исключительную динамичность этих объектов, не­равномерность распределения микробов в них, а также возможность взаимного обмена между микрофлорой указанных объектов. Поэтому при исследовании надо соблюдать следующие правила: анализировать в нескольких повторностях возможно большее количество проб, взятых из разных участков объекта; использовать различные методы количественного учета микроорганизмов. При выполнении вышеприведенных условий полученные величины микробной обсемененности будут характеризовать объект в целом. В санитарно-бактериологических лабораториях для количественного учета микроорганизмов применяют в основном прямой подсчет микроорганизмов и определение микробного числа. Реже используют титрационный посев (метод предельных разведений).

Прямой подсчет микроорганизмов. С помощью этого метода учитывают общее количество живых и мертвых клеток. Метод простой и доступный для использования в санитарно-бактериологических лабораториях, но имеет следующие недостатки. С помощью этого метода трудно различить микроорганизмы и инородные частицы, точно определить количество микроорганизмов, так как они часто образуют большие скопления, неразбивающиеся конгломераты (комочки), невозможно дифференцировать живые микроорганизмы и мертвые, хотя санитарное значение живых и мертвых бактерий неодинаково.

Микробное число. Этот метод позволяет учитывать только живые микроорганизмы. Микробным числом называют количество колоний, которые вырастают на мясопептонном агаре (МПА) при посеве 1 мл или 1 г субстрата и культивировании при 37°С в течение 24— 48 ч (или при 22°С 72 ч).

При определении микробного числа учитывают в основном колонии аэробных метатрофных (сапрофитных) мезофильных микробов, использующих в качестве источников азотного питания белок и продукты его распада. Эти микробы являются основными потребителями органических веществ, вносимых в почву и воду с различными отходами промышленных предприятий, выделениями людей и животных. Количество этих микроорганизмов, как правило, увеличивается в процессе загрязнения внешней среды и уменьшается при ее самоочищении. Следовательно, бактериальное обсеменение субстрата, определяемое этим методом, оказывается значительно меньше, чем при прямом подсчете. Это объясняется также тем, что мертвые клетки при высеве не дадут роста на питательной среде; не растут живые клетки, утратившие способность к размножению; не всегда разбиваются бактериальные конгломераты и одна колония вырастает из нескольких клеток; отсутствуют питательные среды, обеспечивающие рост микроорганизмов всех видов; не вырастут анаэробы, так как культивирование проводят в аэробных условиях; не дадут роста термофилы и психрофилы (посевы выращивают при 37°С, т. е. при температуре, благоприятной для развития мезофильных микроорганизмов); не учитываются грибы (плесени, актино-мицеты), рост которых можно обнаружить только на 3— 4-е сутки. Следовательно, количество микробов, вырастающих на МПА, оказывается во много раз меньше, чем их истинное содержание в высеваемом объекте.

Сапрофитные микробы — основные возбудители порчи пищевых продуктов, поэтому при оценке качества мясных и молочных продуктов определяют микробное число.

Следовательно, по микробному числу можно судить 0 санитарном состоянии почвы, воды, воздуха, пищевых продуктов.

Для некоторых объектов внешней среды разработаны нормы допустимой микробной обсемененности (микробное число), например: для воды питьевой — не более 100 микробов в 1 мл; для консервов «Мясо тушеное» до стерилизации — не более 200 тыс. бактерий в 1 г; для молока пастеризованного категории «А» — до 75 тыс. микробов в 1 мл. При отсутствии официальных норм допустимой микробной обсемененности, введенных в государственные общесоюзные стандарты (ГОСТы), технические условия (ТУ), заключение о доброкачественности продукта, о реализации или браковке его дают на основе практического опыта работы. Так, вареные колбасы I и II сортов считают хорошего качества, если общая микробная обсемененность их не превышает 1000 в 1 г.

Микробную обсемененность объекта выражают в виде титра или индекса.

Титр —это наименьшее количество исследуемого субстрата, в котором обнаружен микроорганизм.

Индекс — количество клеток искомого микроорганизма, обнаруживаемого в определенном объеме исследуемого субстрата, например в 1000 мл воды, в 1 г почвы, в 1 г пищевых продуктов.

Пересчет титра в индекс и обратно производят следующим образом:

Величина микробной обсемененности исследуемого объекта, определенная любым из вышеприведенных методов, как правило, условна, приближенна. Несоответствие этих величин истинному содержанию микробов в объекте объясняется многими причинами, среди которых можно отметить следующие: качество питательной среды, рН среды, наличие в исследуемом субстрате вредно-действующих веществ (например, антибиотики, анилиновые красители и пр.), явление синергизма или, наоборот, антагонизма среди микроорганизмов, вырастающих на питательной среде; фазу развития микробов, находящихся в исследуемом субстрате, и т. д.

В связи с изложенным выше титр или индекс принято выражать в округленных цифрах порядка 10 или а абсолютных цифрах, например, индекс равен 10230 (10230 микробов в 1000 мл воды или в 1 г продукта. Это выражение индекса в абсолютных цифрах можно представить как -104).

Титрационный посев (метод предельных разведений). Его применяют при исследовании объектов, микрофлора которых сравнительно однородна (сыры, кисломолочные продукты). При этом используют среды, наиболее пригодные для развития преобладающих видов микробов.

Определение общей микробной обсемененности

Существуют чашечные и прямые методы учета микроорганизмов.

Чашечные методы. В основном используется метод культивирования микробов на твердых питательных средах. При этом производят посев в чашки Петри с последующей заливкой питательным агаром (глубинный метод) или на поверхность агара при помощи биологической петли или шпателя Дригальского (поверхностный метод). В последнем случае соответствующую питательную среду заливают в чашку за сутки до выполнения анализа и подсушивают. Эффективность метода зависит от выбора питательной среды, точности разведения и тщательности переноса материала в чашки. Во избежание термального шока микроорганизмов, вызванного воздействием расплавленного агара при заливке его в чашки, рекомендуется 1 мл соответствующих разведений гомогената вносить в пробирки с расплавленным и охлажденным агаром. После перемешивания инкулома в агаре, последний выливают на поверхность чашек с питательным агаром на морской воде. Посевы инкубируют при температуре 250С от 2 до 7 суток.

Капельный метод или метод прямого посева на чашку Петри с подсушенной средой рекомендуется использовать при обсемененности продукта не более 300 кл/г. В этом случае чашку Петри с залитой питательной средой подсушивают при температуре 500 С, питательную среду делят на несколько секторов и на отдельные сектора наносят по 2 пробы 0,01 мл соответствующего разведения, распределяют по сектору, подсушивают в течение 1 часа, термостатируют 24 часа при температуре 15, 18, 20, 22, 25, 30, 32, 35 и 370 С в зависимости от физиологических особенностей исследуемых микробов. Чаще всего рекомендуется термостатировать посевы при температуре 220 С в течение 72 часов или при температуре 20-250 С в течение 5 суток.

Определение количества бактерий при температуре 20 и 250 С является наиболее ценным показателем начальной порчи, когда преобладают психрофилы, при температуре термостатирования 350 С, их количество обычно в 10 раз меньше. В последнее время рекомендуется использовать предварительное термостатирование при температуре 300 С в течение 24 часов с последующей инкубацией при температуре 220 С в течение 72 часов.

Согласно «Методической инструкции по санитарно-микробиологическому контролю производства кулинарных изделий из рыбы и нерыбных объектов морского промысла», 1978 посевы инкубируют при температуре 300 С в течение 48 часов или при температуре 20-220 С в течение 24 часов и при температуре 370 С в течение 24 час.

При исследовании продуктов, подвергшихся замораживанию, термической обработке или воздействию других факторов, необходимо учитывать возможность присутствия поврежденных клеток. Установлено, что поврежденные клетки не растут на обычных агаровых средах, но способны развиваться на обогатительных средах, особенно Грамотрицательные бактерии. Повреждение клеток обратимо, их способность к размножению восстанавливается в соответствующей питательной среде.

Для роста поврежденных клеток наилучшими условиями является температура инкубации 320С, рН 8, наличие сахарозы. Присутствие глюкозы и лактозы тормозят этот процесс.

При определении общей обсемененности посев обычно проводят из одного или двух разведений на параллельные чашки (не менее двух). После инкубации подсчитывают все колонии, используя лупу, малое увеличение микроскопа или машинки для счета колоний. При окончательном подсчете учитывают разведение и объем пробы. Количество микроорганизмов в отдельных чашках складывают, определяют среднюю арифметическую, результат пересчитывают на 1 г навески (см. выше).

Арифметический метод подсчета бактерий до некоторой степени неточен, поэтому рекомендуется использовать логарифмический метод – подсчет клеток с помощью специальной таблицы. Для определения среднего количества бактерий находят средний логарифм, а затем по таблице количество бактерий соответствующее этому логарифму. (Стандартные методы бактериологических анализов, 1985, Канада)

Таблица 13

Пример расчета

n*104 логарифмы
5,04
5,08
4,95
5,18
5,32
6,48
х=61,3*104 х-5,34 соответствующее число клеток – 22*104

Как видим, конечный результат разнится почти в три раза.

При определении общей бактериальной обсемененности рекомендуются разнообразные питательные среды. Это агар Oxoid C№3, триптонодрожжевой агар с глюкозой, мясопептонный агар, рыбопептонный агар. Для учета общего количества аэробов рекомендуют использовать агар Югона, содержащий 0,5% декстрозы, которая способствует лучшему росту аэробов. Для подсчета организмов образующих H2S, используют РПА с добавлением сульфата железа. Посевы инкубируют при температуре 200С в течение 4-х суток. Колонии вырастают под агаром и имеют черный или серый цвет. Для быстрого выявления бактерий с протеолитическими свойствами используют среду, состоящую из смеси агара и желатина. В стерильные чашки Петри вносят стерильную питательную среду №1 (РПА), на поверхность застывшей среды наносят 0,1 мл соответствующего разведения исследуемого материала и распределяют стерильным шпателем Дригальского. Затем поверхность каждой чашки заливают 2,5 мл питательной среды №2 (РПЖ) и быстро распределяют равномерным слоем. Инкубируют посев при температуре 200С в течение 3-х суток. Сначала считают общую бактериальную обсемененность, затем чашки заливают 10 мл 5% лимонной кислоты для осаждения оставшегося желатина и через 15 минут подсчитывают колонии с зоной просветления (протеолитические). Непосредственный подсчет колоний протеолитических бактерий, присутствующих на беспозвоночных, представляет большой интерес для установления сроков их холодильного хранения.

Для подсчета плесневых грибов рекомендуется использовать питательный агар с 0,5% NaCl и антибиотиками, среду Чапека или Сабуро.

4.5.1.2. Прямые методы.

Помимо чашечных методов применяется прямой (бактериостатический) метод учета микроорганизмов. Этот метод дает возможность быстро определить степень обсемененности продукта. С помощью стерильного стекла берут отпечаток с поверхности или с глубины мышц. Препарат подсушивают, фиксируют, окрашивают по Граму или метиленовой синью. Просчитывают число клеток в 10 полях зрения при увеличении объектива микроскопа *90 и определяют среднее число клеток в поле зрения. Считают , что 1 клетка в поле зрения микроскопа соответствует 5х105 кл на 1 г исследуемого продукта.

Этот метод имеет ряд недостатков – нередко образуются микроколонии, которые не распадаются даже при гомогенезации, иногда микробные клетки трудно отличить от примесей другой природы.

В этом случае, когда продукт имеет большую бактериальную обсемененность допустимо приготовить гомогенат продукта и нанести на определенную площадку предметного стекла (1 см2, 4см2) 0,1 мл гомогената, равномерно распределить по площадке, препарат высушить, зафиксировать, окрасить по Граму и просчитать в микроскоп при увеличении объектива 90х. При наличии в поле зрения менее 10 клеток просчитывается 20 полей зрения, 10-50 клеток – 10 полей зрения, а более 50 клеток – 5 полей зрения. Затем определяют среднюю арифметическую численность клеток в поле зрения.

Санитарно-микробиологическое исследование воздуха

Санитарно-микробиологическое исследование воздуха можно разделить на 4 этапа:

  1. отбор проб;
  2. обработка, транспортировка, хранение проб, получение концентрата микроорганизмов (если необходимо);
  3. бактериологический посев, культивирование микроорганизмов;
  4. идентификация выделенной культуры.

Отбор проб, как и при исследовании любого объекта, является наиболее ответственным. Правильное взятие проб гарантирует точность исследования. В закрытых помещениях точки отбора проб устанавливаются из расчета на каждые 20 м2 площади — одна проба воздуха, по типу конверта: 4 точки по углам комнаты (на расстоянии 0,5 м от стен) и 5-я точка — в центре. Пробы воздуха забираются на высоте 1,6—1,8 м от пола — на уровне дыхания в жилых помещениях. Пробы необходимо отбирать днем (в период активной деятельности человека), после влажной уборки и проветривания помещения. Атмосферный воздух исследуют в жилой зоне на уровне 0,5—2 м от земли вблизи источников загрязнения, а также в зеленых зонах (парки, сады и т.д.) для оценки их влияния на микрофлору воздуха. Для отбора воздуха на уровне 0,5-2м от земли используют специальные штативы.

Следует обратить внимание на то, что при отборе проб воздуха во многих случаях происходит посев его на питательную среду.

Все методы отбора проб воздуха можно разделить на седиментационные и аспирационные.

Седиментационный — наиболее старый метод, широко распространен благодаря простоте и доступности, однако является неточным. Метод предложен Р. Кохом и заключается в способности микроорганизмов под действием силы тяжести и под влиянием движения воздуха (вместе с частицами пыли и капельками аэрозоля) оседать на поверхность питательной среды в открытые чашки Петри. Чашки устанавливаются в точках отбора на горизонтальной поверхности. При определении общей микробной обсемененности чашки с мясопептонным агаром оставляют открытыми на 5—10 мин или дольше в зависимости от степени предполагаемого бактериального загрязнения. Для выявления санитарно-показательных микробов применяют среду Гарро или Туржецкого (для обнаружения стрептококков), молочно-солевой или желточно-солевой агар (для определения стафилококков), суслоагар или среду Сабуро (для выявления дрожжей и грибов). При определении санитарно- показательных микроорганизмов чашки оставляют открытыми в течение 40—60 мин.

По окончании экспозиции все чашки закрывают, помещают в анаэростат или термостат для культивирования в оптимальной для развития выделяемого микроорганизма среде, затем (если этого требуют исследования) на 48 ч оставляют при комнатной температуре для образования пигмента пигментообразующими микроорганизмами.

Седиментационный метод имеет ряд недостатков: на поверхность среды оседают только грубодисперсные фракции аэрозоля; нередко колонии образуются не из единичной клетки, а из скопления микробов; на применяемых питательных средах вырастает только часть воздушной микрофлоры. К тому же этот метод совершенно непригоден при исследовании бактериальной загрязненности атмосферного воздуха.

Более совершенными методами являются аспирационные, основанные на принудительном осаждении микроорганизмов из воздуха на поверхность плотной питательной среды или в улавливающую жидкость (мясо-пептонный бульон, буферный раствор, изотонический раствор хлорида натрия и др.). В практике санитарной службы при аспирационном взятии проб используются аппарат Кротова, пробоотборное устройство ПУ-1Б, бактериоуловитель Речменского, прибор для отбора проб воздуха (ПОВ-1), пробоотборник аэрозольный бактериологический (ПАБ-1), бактериально-вирусный электропреципитатор (БВЭП-1), прибор Киктенко, приборы Андерсена, Дьяконова, МБ и др. Для исследования атмосферы могут быть использованы и мембранные фильтры № 4, через которые воздух просасывается с помощью аппарата Зейтца. Большое разнообразие приборов свидетельствует об отсутствии универсального аппарата и о большей или меньшей степени их несовершенства.

Пробоотборное устройство ПУ-1Б. В настоящее время этот прибор широко применяется при исследовании воздуха закрытых помещений и имеется в лабораториях СЭС.

Принцип работы ПУ-1Б основан на том, что воздух, просасываемый через отверстия в крышке аппарата, ударяется о поверхность питательной среды, при этом частицы пыли и аэрозоля прилипают к среде, а вместе с ними и микроорганизмы, находящиеся в воздухе. Чашку Петри с тонким слоем среды укрепляют на вращающемся столике аппарата, что обеспечивает равномерное распределение бактерий на ее поверхности. Работает аппарат от электросети. После отбора пробы с определенной экспозицией чашку вынимают, закрывают крышкой и помещают на 48 ч в термостат. Обычно отбор проб проводят со скоростью 200 л/мин в течение 0,5-5 мин. Таким образом, определяется флора в 100-1000 л воздуха.

Приемник перед забором пробы воздуха заполняется 3—5 мл улавливающей жидкости (водой, мясопептонным бульоном, изотоническим раствором хлорида натрия).

Пробоотборник аэрозольный бактериологический (ПАБ-1) (в настоящее время снят с производства). Механизм действия ПАБ-1 основан на принципе электростатического осаждения частиц аэрозоля (а следовательно, и микроорганизмов) из воздуха при прохождении его через прибор, в котором эти частицы получают электрический заряд и осаждаются на электродах с противоположным знаком. На электродах для улавливания аэрозолей помещают в горизонтальном положении металлические поддоны с твердыми средами в чашках Петри или жидкой питательной средой (15—20 мл). Прибор переносной с большой производительностью 150-250 л/мин, т.е. за 1 ч можно отобрать 5—6 м3 воздуха. Его рекомендуют применять для исследования больших объемов воздуха при обнаружении условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, например, при выявлении в воздухе палат больниц возбудителей внутрибольничных инфекций (Pseudomonas aeruginosa. Staph, aureus и др.), определении сальмонелл и эшерихий в атмосферном воздухе в местах дождевания при орошении земледельческих полей сточными водами.

При использовании любого из перечисленных приборов получаемые результаты являются приблизительными, однако они дают более правильную оценку обсемененности воздуха в сравнении с седиментационным методом. Поскольку и отбор и санитарно-микробиологические исследования воздуха не регламентированы ГОСТ, то можно использовать любой прибор для оценки бактериальной загрязненности воздуха. Во многих случаях отбор проб совмещен с этапом посева.

Для снижения численности микроорганизмов в воздухе закрытых помещений применяют следующие средства:

  1. химические — обработка озоном, двуокисью азота, распыление молочной кислоты,
  2. механические — пропускание воздуха через специальные фильтры,
  3. физические — ультрафиолетовое облучение.

Определение общей численности сапрофитных бактерий

Общая бактериальная обсемененность воздуха или микробное число — это суммарное количество микроорганизмов, содержащихся в 1 м3 воздуха. Для определения общего количества бактерий в воздухе закрытых помещений забирают две пробы (объемом по 100 л каждая) на чашки Петри с МПА при помощи Пу-1Б, либо седиментационным методом, расставляя чашки с питательной средой по принципу конверта. Чашки с посевом помещают в термостат на сутки, а затем на 48 ч оставляют при комнатной температуре. Экспозиция чашек с посевами на свету дает возможность подсчитать раздельно количество пигментных колоний (желтых, белых, розовых, черных, оранжевых и др.), количество спорообразующих бацилл, грибов и актиномицетов.

Подсчитывают количество колоний на обеих чашках, вычисляют среднее арифметическое и делают перерасчет на количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха. Бациллы образуют колонии, как правило, крупные, круглые, с неровными краями, сухие, морщинистые. Колонии грибов с пушистым налетом (Мисог и Aspergillus) и плотные — зеленоватые или сероватые (Penicillium). Актиномицеты образуют беловатые колонии, вросшие в агар. Количество каждой группы колоний (пигментных, беспигментных, плесеней, бацилл, актиномицетов) выражают в процентах по отношению к общему числу.

При определении микробного числа методом седиментации по Коху подсчитываются колонии, выросшие на МПА в чашках Петри, и расчет ведется по B.Л. Омелянскому. Если придерживаться этой методики, на чашку площадью 100 см2 за 5 мин оседает такое количество микробов, которое содержится в 10 л воздуха.

Определение стафилококков

Стафилококки являются одним из наиболее распространенных микроорганизмов в воздухе закрытых помещений, что обусловливается значительной устойчивостью их к различным факторам окружающей среды. Обнаружение патогенных стафилококков в воздухе закрытых помещений имеет санитарно-показательное значение и свидетельствует об эпидемическом неблагополучии. Отбор проб воздуха проводится в количестве 250 л на 2—3 чашки с молочно-желточно-солевым агаром (или молочно- солевым, желточно-солевым) и на чашку с кровяным агаром. Чашки инкубируют при температуре 37°С в течение 48 ч. Изучают культуральные признаки всех видов колоний, из подозрительных готовят мазки и окрашивают по Граму.

Помимо качественной характеристики отдельных колоний, подсчитывают количество выросших колоний стафилококков в 1 м3 воздуха.

Определение стрептококков

Стрептококки также являются санитарно-показательными микроорганизмами воздуха, в который они попадают от больных скарлатиной, тонзиллитами, ангиной и носителей стрептококков. Отбор проб воздуха при исследовании на наличие а- и р-гемолитических стрептококков производят на чашки с кровяным агаром, средами Гарро и Туржецкого. Забирают 200—250 л воздуха, чашки с посевами выдерживают в термостате 18—24 ч и затем еще 48 ч при комнатной температуре (после предварительного просмотра и учета). Идентификацию проводят по общепринятой методике.

Определение патогенных микроорганизмов в воздухе

Ввиду малой концентрации патогенных микроорганизмов в воздухе закрытых помещений, их выделение является достаточно трудной задачей.

При расшифровке внутрибольничных инфекций определяют в воздухе присутствие стафилококков, стрептококков, синегнойной палочки, сальмонелл, протеев и др. Отбор проб воздуха производят в объеме не менее 1000 л. Посев производят на соответствующие элективные среды. Если используется жидкая среда как улавливающая жидкость, то пробирку с жидкостью помещают в термостат на сутки для подращивания (получение накопительной культуры), а затем высевают на элективную среду.

При исследовании воздуха на наличие микобактерий туберкулеза отбор проб производят в объеме 250—500 л воздуха. В качестве улавливающей жидкости берут среду Школьниковой, которую затем обрабатывают 3% раствором серной кислоты (для подавления сопутствующей микрофлоры) и центрифугируют. Осадок засевают в пробирки на одну из яичных сред, чаще среду Левенштейна — Иенсена. Инкубируют при 37°С до 3 мес. Отсутствие роста в течение 3 мес дает возможность выдать отрицательный ответ. Пробирки первый раз просматривают через 3 нед, затем каждые 10 дней. Выделенную культуру идентифицируют, определяют ее вирулентность (заражением морских свинок — биопроба) и при необходимости определяют устойчивость к лекарственным препаратам.

При определении в воздухе коринебактерий дифтерии для посева воздуха используют чашки со средой Клауберга.

В последние годы определяют в атмосферном воздухе в районах дождевания земледельческих полей, при орошении их сточными водами, сальмонеллы в случае появления заболевания среди персонала станций орошения или населения. Отбор проб производят с помощью аспиратора ПУ-1Б на чашки с висмут-сульфитным агаром. Исследуют не менее 200 л воздуха. Выделенная культура идентифицируется по обычной схеме определения сальмонелл.

В связи с развитием микробиологической промышленности возникла необходимость исследования воздуха с целью обнаружения грибов-продуцентов при производстве антибиотиков, ферментных препаратов, при изготовлении кормовых дрожжей и др. Для исследования воздуха на плесневые грибы рода Candida отбор проб производят в объеме от 100 до 1000 л на чашки со средой Чапека, суслоагаром (для обнаружения плесневых грибов) и с метабисульфит-натрий- агаром (МБС-агар) с добавлением антибиотиков (для обнаружения дрожжеподобных грибов рода Candida). Чашки инкубируют в термостате при температуре 26—27°С в течение 3—4 сут (для плесневых грибов) и при 35—37°С в течение 2—3 сут (для грибов — продуцентов и дрожжеподобных рода Candida). Идентификация проводится с учетом особенностей плодоносящих гиф и характера мицелия. Считают, что концентрация дрожжеподобных грибов в количестве 500—600 клеток в 1 м3 воздуха рабочего помещения является предельной, превышение ее ведет к развитию аллергических реакций у рабочих.

Асептика в работе операционного блока

Операционный блок (отделение) представляет собой ком­плекс помещений, предназначенных для выполнения хи­рургических операций. Структура и режим работы опе­рационного блока подчинен одному принципу — соблю­дению асептики при выполнении хирургических вмеша­тельств.

Реализация этого принципа начинается с размещения опе­рационного блока. Желательно, чтобы он находился либо в изо­лированном крыле здания, либо в специальной пристройке, где располагается центральное стерилизационное отделение (ЦСО). В общем здании операционный блок должен быть рас­положен не ниже второго этажа. Все подразделения соединя­ются грузовыми лифтами (для грязных и чистых материалов от­дельно).

В соответствии с правилами асептики выделяют 4 зоны.

I зона —- стерильного р еж и м а. В этой зоне находят­ся помещения, предназначенные для проведения операций и подготовки к ним: I) операционный(е) зал(ы), 2) предопе­рационная, где происходит обработка рук операционной сес­тры и хирургов, 3) стерилизационная, в которой производит­ся предстерилизационная очистка и обеспложивание инстру­ментов, используемых повторно или внезапно понадобивших­ся по ходу операции.

Вход в зону стерильного режима строго ограничивается. В нее допускаются только участники операции (операци­онная сестра, хирург и его ассистенты, анестезиологи и сестра-анестезистка) в стерильной одежде и бахилах.

Все помещения зоны должны иметь выход в общий внут­ренний коридор, соединяющийся тамбуром с коридором вто­рой зоны.

При планировании и строительстве операционного блока предусматриваются меры, облегчающие поддержание его чис­тоты. Стены помещений стерильной зоны до потолка покры­вают керамическими плитками, потолок окрашивают масля­ной краской, пол покрывают керамической или мраморной плиткой. Углы делают закругленными. Отопительные приборы располагают внутри стен, что облегчает уборку помещений. В операционной поддерживаются определенный температурный режим (18,5—23,8 °С), влажность (50—55 %), вентиляция. Пос­ледняя обеспечивается установкой кондиционеров с 30-крат­ной заменой воздуха в течение I ч. Это создает климатические параметры, оптимальные для работы операционной бригады. Нежелательна как высокая (более 25 °С), так и низкая темпе­ратура (ниже 18 °С). В последнем случае возможно переохлаж­дение больного с развитием таких осложнений, как пневмо­ния п др.; высокая температура воздуха затрудняет работу хи­рургов.

Для поддержания чистоты в помещениях зоны стериль­ного режима осуществляется 5 видов уборки: предвари­тельная, текущая, послеоперационная, заключительная, гене­ральная.

Перед началом работы в операционной удаляется влажной тряпкой пыль с горизонтальных поверхностей (подоконники, приборы, пол) — предварительная уборка.

Текущая уборка проводится в ходе операции: убирают случайно упавшие на пол шарики, салфетки, инструмен­ты, вытирают пролитую жидкость, при загрязнении пола гноем или калом его протирают дезинфицирующими раство­рами.

Послеоперационная уборка производится после того, как больного вывезут из операционной: удаляют использован­ные салфетки, шарики, операционное белье, инструмен­ты, протирают пол дезинфицирующими растворами, опе­рационный стол протирают и накрывают стерильной про­стыней.

Заключительная уборка выполняется в конце операционно­го дня: протирают влажной тряпкой аппаратуру, операцион­ный стол, пол, подставки для ног; часть стен моют с помо­щью щеток или швабр растворами антисептиков (6 % ра­створ перекиси водорода, первомур, роккал, 2 % раствор хлор­амина).

Для стерилизации воздуха используют настенные, пото­лочные, передвижные (типа «Маяк») бактерицидные лам­пы. Очистка воздуха осуществляется с помощью кондици­онеров.

Генеральная уборка производится в свободный от опе­раций день (1 раз в неделю). Операционную (пол, стены и по­толок) моют водой с моющими веществами типа «Лотос», «Но­вость» и антисептиками (2 % раствор хлорамина, 6 % раствор перекиси водорода). Антисептиками протирают мебель и при­боры.

Необходимо подчеркнуть, что поддержание операционной п асептических условиях возможно лишь при добросовестном выполнении своих обязанностей и взаимодействии хирурга, операционной сестры и санитарки, анестезиологической бри­гады.

II зона — строгого режима. В нее входят помеще­ния, в которых проводят работу по обеспечению готовности операционного блока к операциям. Здесь находятся душевая и комнаты для переодевания, двери которой выходят в коридор «стерильной» зоны, комнаты для хранения аппаратов и инст­рументария для операций; аппаратная анестезиологической службы; материальная, где хранятся перевязочный материал,

чистое операционное белье, медикаменты; кладовая для хра­нения предметов уборки операционных залов; комната для опе­рационных сестер и санитарок; кабинет старшей операцион­ной сестры, комната для записи протоколов операций.

Вход и выход из этой зоны производятся через тамбур и разрешены сотрудникам больницы, одетым в больничную одеж­ду — халат, шапочку, тапочки. Нельзя допускать на террито­рию операционного блока людей, у которых из-под халата вы­ступает одежда, не убраны под шапочку волосы. Технические работники (слесари, водопроводчики и др.) также должны быть переодеты в специальную одежду и обувь, им должны быть заранее разъяснены правила поведения в операционном бло­ке.

Работники операционного блока, придя на работу, долж­ны переодеться и сменить обувь, а в зоне строгого режима еще раз переодеться, сменив халат и шапочку на брючный костюм, а обувь — на тапочки или другие туфли, предназначенные только для работы в операционном блоке.

Зоны строгого и стерильного режима разделяют полосой красного цвета, обозначенной на полу. При переходе в стериль­ное помещение необходимо надеть маску (маски, состоящие из 4—6 слоев марли, должны быть простерилизованы), бахи­лы. Участникам операции нежелательно иметь бороды, бакен­барды, длинные волосы.

III зона — ограниченного режима (техничес­
кая зона). В нее входят производственные помещения для
обеспечения работы операционного блока: комната с аппара­
турой для кондиционирования воздуха; фотолаборатория; ак­
кумуляторная; установка для обеспечения операционной кис­
лородом и наркотическими газами и т.д.

IV зона — общего р еж и м а. В ней находятся кабинет
заведующего отделением, помещение для грязного белья, сан­
узел и др.

Поскольку основным источником инфицирования являет­ся человек, понятно, что чем меньше людей будет находиться на территории операционного блока, тем меньше он будет загрязнен. Число присутствующих в зоне стерильного режима (кроме участников операции) максимально ограничивается. Учащихся инструктируют о правилах поведения: рекомендует­ся как можно меньше двигаться, не выходить и вновь входить н операционные залы, ограничить разговоры. Лучше, чтобы студенты наблюдали за работой в операционной через стеклян­ный колпак, расположенный на 2-м этаже.

В операционной периодически осуществляется бактериоло­гический контроль за стерильностью воздуха, инструментария, перевязочного материала, операционного белья. Один раз в

неделю проводится выборочный контроль стерильности рук участников операции.

В предоперационной берут посевы с тазов для обработки рук. умывальников, мыла. Контролируется стерильность рабочего столика анестезиологов, аппаратуры для наркоза (ларингоскоп, интубациониые трубки и т.д.), рук врача-анестезиолога и сес-тры-анестезистки.

Допустимые уровни микробной обсемененности воздуха помещений некоторых отделений стационаров

Место отбора проб

Время отбора проб

Результаты исследования (КОЕ/м3)

Общее количество микроорганизмов

1 м3 воздуха

на золотистый стафилококк

на грамотрицательные бактерии

Операционный блок

До работы

Не более 100

Отсутствие

Отсутствие

После работы

Не более 1000

Отсутствие

Отсутствие

Реанимацион-ное отделение (палаты)

Подготовленные к работе

Не более 1000

Не более 4

Отсутствие

Процедурная

До работы

Не более 50

Отсутствие

Отсутствие

Во время работы

Не более 1000

Не более 1-2

Не более 1-2

В воздухе больничных помещений доминируют золотистый стафилококк и стрептококки. При этом в 1 м3воздуха операционных залов, послеоперационных палат, перевязочных, отделений реанимации, родильных залов они должны отсутствовать.

В связи с ростом частоты заболеваний, вызываемых грамотрицательными бактериями, в нормативы включено определение их количества в 1 м3 воздуха помещений лечебных учреждений.

Особый случай – воздух аптечных помещений, где из-за наличия антимикробных препаратов могут быстро погибать бактерии, но сохраняться грибы, поэтому их обязательно необходимо выявлять при исследовании воздуха аптек.

Дополнительные критерии. Как показатель запыленности и отсутствия влажной уборки расценивают присутствие спорообразующих палочек, а показателем влажности – плесневых грибов. Показатель плохой освещенности – отсутствие пигментообразующих форм бактерий (иногда этот показатель может быть определен по заданию фтизиатров).

Методы выделения микроорганизмов из воздуха. Известны два метода забора проб для бактериологического анализа воздуха. Самый простой, не требующий специальной аппаратуры, -седиментационный метод Коха, по которому о степени микробной обсемененности судят по количеству выросших колоний на МПА в чашке Петри после того, как 2 чашки выдерживают открытыми на воздухе в течение 30 мин, потом посевы инкубируют в термостате при 370С и выявляют видовую принадлежность микроорганизмов. Чаще всего в воздухе определяют ОМЧ (применяют чашки с МПА), содержание стафилококков (применяют чашки с желточно-солевым агаром), по эпидемическим показаниям определяют содержание стрептококков (применяют чашки с кровяным агаром). При обследовании воздуха аптек производят определение содержания грибов, используя чашки со средой Сабуро. Результаты оценивают по суммарному числу колоний, выросших на обеих чашках. Про спокойном состоянии воздуха на площадь 100 см2оседает столько микроорганизмов, сколько их содержится в 0,01 м3воздуха. Этот метод используется как ориентировочный. Определение микробного числа воздуха поводят по формуле Омелянского:

а х100х1000х5

х = ————————, где а – количество выросших на чашке колоний;

bx10xtb– площадь чашки;t– время в течение которой чашка была открыта; 5 – время по расчету Омелянского; 10 – объем воздуха ( в литрах), из которого происходит оседание микробов за 5 мин; 100 – площадь в см2, на которую происходило оседание; 1000 – искомый объем воздуха в литрах.

Рис. 1. Аппарат Кротова для бактериологического исследования воздуха.

Более совершенным является аспирационный метод с использованием аппарата Кротова (рис. 1), который основан на ударном действии струи воздуха. Принцип действия прибора основан на механическом прокачивании воздуха через клиновидную щель в крышке, расположенной над вращающейся поверхностью питательной среды в чашке Петри. За 1 мин через узкую щель плексигласовой пластины просасывается 25 л воздуха, микробы из которого оседают на поверхность питательной среды в чашке Петри, при этом благодаря постоянному вращению чашки под входной щелью, микроорганизмы равномерно фиксируются по всех поверхности среды. В качестве питательной среды для определения микробного числа используется МПА, а для определения СПМ – кровяной агар. Большим преимуществом этого метода является возможность посева определенного объема воздуха.

После инкубации посева в термостате подсчитывают количество колоний и проводят расчет микробного числа по формуле:

а 10000

х = ——————, где а – количество выросших на чашке колоний;

VV– объем пропущенного воздуха через прибор, дм3;

1000 – искомый объем воздуха, дм3.

Основные показатели санитарного состояния воздуха следующие:

Общее микробное число (ОМЧ) воздуха– количество колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 м3воздуха (подсчитывают колонии, вырастающие на поверхности питательного агара при посеве определенного объема воздуха и инкубации в течение 24 ч при 370С и 24 ч при комнатной температуре.

Присутствие Staphylococcus aureus. В определенном объеме воздуха определяют наличие золотистого стафилококка (воздух засевают на желточно-солевой агар, где вырастают характерные колонии грамположительных кокков, обладающих ферментом плазмокоагулазлй).

Присутствие грибов. Определяют наличие в воздухе дрожжеподобных и плесневых грибов – подсчитывают количество колоний, вырастающих на среде Сабуро за 96 ч при 22-280С.

Присутствие патогенных микроорганизмов. По эпидемиологическим показаниям в воздухе определяют наличие сальмонелл, микобактерий, вирусов.

Индекс санитарно-показательных микроорганизмов – количество золотистого стафилококка и гемолитических стрептококков в 1 м3воздуха. Эти бактерии являются представителями микрофлоры верхних дыхательных путей и имеют общий путь выделения с патогенными микроорганизмами, передающимися воздушно-капельным путем.

Конкретные цели:

  • Ознакомиться с методами и объектами изучения санитарной микробиологии воздуха.

  • Научиться трактовать методы и способы забора проб воздуха закрытых помещений для определения СПМ.

  • Изучить основные СПМ воздуха закрытых помещений.

  • Научиться анализировать и оценивать допустимые уровни микробной обсемененности воздуха помещений.

Уметь:

Определение микробного числа воздуха.

  • Главная
  • Избранное
  • Популярное
  • Новые добавления
  • Случайная статья

⇐ Предыдущая123

Определение количества бактерий осуществляется седиментационным или аспирационным методами.

Седиментационный метод основан на естественном осаждении бактерий из воздуха на чашку Петри с питательной средой и последующим выдерживанием в термостате в течение двух суток при температуре 37°С и подсчетом колоний, выросших за это время на всей площади чашки.

Принцип аспирационного метода — аспирация определенного объема воздуха с высеванием содержащихся в нем бактерий на поверхность

Микробное число воздуха – это количество колониеобразующих микроорганизмов, выросших на мясо-пептонном агаре (МПА) при 37°С в течение 48 часов при посеве 1 м3 воздуха.

Определение микробного числа воздуха.

В прибор Кротова помещается чашка Петри с мясопептонным агаром, отбирается проба воздуха со скоростью 20 л/мин. в течение 20 минут, чашка помещается в термостат на 48 часов при температуре 37 градусов.

Санитарная оценка ведётся путём сравнения микробного числа с допустимой обсеменённостью воздуха того или иного помещения.

Пример: скорость отбора пробы воздуха равна 20 л/мин., продолжительность отбора пробы воздуха 25 минут, атмосферное давление равно 755 мм рт. ст., температура воздуха рана 20°С, через 24 часа на чашке Петри выросло 60 колоний микроорганизмов. Рассчитать микробное число воздуха.

1.Определяем, из какого объёма воздуха выросли колонии:


Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *